[发明专利]异丁香酚单加氧酶活性聚集体的构建方法及转化异丁香酚生产香草醛的方法在审

专利信息
申请号: 201710369478.5 申请日: 2017-05-23
公开(公告)号: CN107236753A 公开(公告)日: 2017-10-10
发明(设计)人: 赵丽青 申请(专利权)人: 深圳大学
主分类号: C12N15/70 分类号: C12N15/70;C12N9/04;C12P7/24;C12R1/19
代理公司: 深圳市瑞方达知识产权事务所(普通合伙)44314 代理人: 王少虹,纪媛媛
地址: 518060 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明公开了一种异丁香酚单加氧酶活性聚集体的构建方法及转化异丁香酚生产香草醛的方法,构建方法包括S1、构建用于生产异丁香酚单加氧酶活性聚集体的重组大肠杆菌将具有两亲性自组装功能的短肽18A与目标基因异丁香酚单加氧酶连接,构建异丁香酚单加氧酶‑18A活性聚集体,并在大肠杆菌中表达,获得重组大肠杆菌;S2、使用构建的所述重组大肠杆菌生产异丁香酚单加氧酶活性聚集体将构建的所述重组大肠杆菌进行培养优化、诱导,离心收集诱导后的菌体,破碎细胞以获得粗酶液,所得粗酶液即为异丁香酚单加氧酶活性聚集体。本发明实现香草醛的高效生产,便于工业生产应用。
搜索关键词: 丁香 酚单加氧酶 活性 聚集体 构建 方法 转化 生产 香草
【主权项】:
一种异丁香酚单加氧酶活性聚集体的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、构建用于生产异丁香酚单加氧酶活性聚集体的重组大肠杆菌:将具有两亲性自组装功能的短肽18A与目标基因异丁香酚单加氧酶连接,构建异丁香酚单加氧酶‑18A活性聚集体,并在大肠杆菌中表达,获得重组大肠杆菌;S2、使用构建的所述重组大肠杆菌生产异丁香酚单加氧酶活性聚集体:将构建的所述重组大肠杆菌进行培养优化、诱导,离心收集诱导后的菌体,破碎细胞以获得粗酶液,将所得粗酶液离心和/或过滤,得到沉淀即为异丁香酚单加氧酶活性聚集体。
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