[发明专利]一种前白蛋白多抗血清的制备方法及其应用在审
申请号: | 201710392525.8 | 申请日: | 2017-05-27 |
公开(公告)号: | CN107312089A | 公开(公告)日: | 2017-11-03 |
发明(设计)人: | 李宁;苏少博 | 申请(专利权)人: | 山西瑞亚力生物技术有限公司 |
主分类号: | C07K16/18 | 分类号: | C07K16/18;C07K16/06;G01N33/68 |
代理公司: | 山西五维专利事务所(有限公司)14105 | 代理人: | 茹牡花 |
地址: | 048100 山西省晋*** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | 本发明属于体外诊断试剂技术领域,具体涉及一种前白蛋白多抗血清的制备方法及其应用。经过采血、分离、沉淀、离心、复溶等完成。本发明具有使得溶液处于稳定的饱和状态,保证盐析的进行;减少了血浆中的杂蛋白;实现了血清除杂,操作简单,而且血清损耗少,获得的血清可以直接用于诊断试剂生产等优点。 | ||
搜索关键词: | 一种 白蛋白 多抗 血清 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种前白蛋白多抗血清的制备方法,其特征是,包括以下步骤:1)采血:使用无菌采血法采集羊全血至血袋内备用;2)分离:将步骤1)采集的羊全血置于高速冷冻离心机中,在温度为4℃的条件下,采用3000~5000rpm的转速,离心10min,待离心结束后取上清液备用;3)沉淀:在步骤2)处理好的上清液中按照体积比为上清液:1%氨水的饱和硫酸铵溶液:生理盐水=3:5:2的比例加入含1%氨水的饱和硫酸铵溶液和生理盐水,置于磁力搅拌器上搅拌2~3小时,制得混合溶液;4)离心:将步骤3)制得的混合溶液置于高速冷冻离心机中,在温度为4℃的条件下,采用8000~1000rpm的转速,离心10min,弃上清,沉淀物备用;5)复溶:将步骤4)制得的沉淀物中再按照体积比为沉淀物:1%氨水的饱和硫酸铵溶液:生理盐水=3:5:2的比例加入含1%氨水的饱和硫酸铵溶液和生理盐水,置于磁力搅拌器上搅拌2~3小时,制得混合溶液;6)重离心:将步骤5)制得的混合溶液再置于高速冷冻离心机中,在温度为4℃的条件下,采用8000~1000rpm的转速,离心10min,弃上清,沉淀物备用;7)再在步骤6)制得的沉淀物中加入体积比为沉淀物:生理盐水=3:2的生理盐水,置于磁力搅拌器上搅拌10~15分钟,将混合液装入透析袋,在生理盐水环境中透析72h~96h,每24h更换一次生理盐水,透析结束后得透析液;8)将步骤7)制得的透析液倒出,置于高速冷冻离心机中,在温度为4℃的条件下,采用8000~1000rpm的转速,离心10min,弃沉淀,在上清中加体积分数为4%的PEG‑6000,制得前白蛋白多抗血清。
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