[发明专利]一种用于早期肝细胞损伤诊断的检测方法

摘要

本发明公开了一种用于早期肝细胞损伤诊断的检测方法，包括样品准备、试剂盒准备、样品测定和计算样品中GR活力值四步，其由NADPH（还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷磷酸）供氢，GR可以催化氧化型谷胱甘肽（GSSG）还原生成还原型谷胱甘肽（GSH），NADPH在340nm波长处有强烈光吸收，反应中NADPH被氧化成NADP+（氧化型尼克酰胺腺嘌呤二核苷磷酸），引起340nm波长处吸光度下降，此种下降速率与样本中GR的活性成正比，因此通过测定A340的下降速率就可以计算出GR的活性水平，是一种简单易行的通过紫外酶法来检测血清、血浆或其它样品中GR活性的一种方法，其灵敏度高、稳定性好。

主权项

一种用于早期肝细胞损伤诊断的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：样品准备，包括有新鲜不溶血的血清、含抗凝剂的血浆和红细胞裂解液三种；S2：试剂盒准备，包括有空白管、校准品管、样本管、蒸馏水、校准品、样本、R1试剂和R2试剂；S3：样品测定，包括如下步骤：S3.1：依次取空白管加入8μl的蒸馏水、取校准品管加入8μl的校准品、取样本管加入8μl的样本；S3.2：分别向S3.1中的空白管、校准品管、样本管中添加R1试剂混合均匀，置37℃孵育300s；S3.3：再向添加R1试剂后的空白管、校准品管、样本管中添加R2试剂混合均匀；S3.4：将添加R2试剂后的空白管、校准品管、样本管置37℃孵育60s后，在340nm波长处，每隔20 s读取吸光度，连续读数120s，计算平均变化率△A/min；S4：计算样品中GR活力值，包括血清、血浆样本值和红血球样本值。