[发明专利]尖状栅藻合成淀粉缺陷型突变株及其应用有效
申请号: | 201710400736.1 | 申请日: | 2017-05-31 |
公开(公告)号: | CN107354147B | 公开(公告)日: | 2021-01-19 |
发明(设计)人: | 韩丹翔;孙文超;吴明灿;胡强 | 申请(专利权)人: | 国投生物科技投资有限公司 |
主分类号: | C12N15/01 | 分类号: | C12N15/01;C12N1/12;C12P7/64;C12Q1/04;C12R1/89 |
代理公司: | 北京智为时代知识产权代理事务所(普通合伙) 11498 | 代理人: | 王加岭;杨静 |
地址: | 100034 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供经突变筛选后得到的尖状栅藻合成淀粉缺陷型突变株MSA1和MSA5;其保藏编号分别为CGMCC No.13864和CGMCC No.13866,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。本发明通过筛选出不合成淀粉或者淀粉合成量极少的淀粉合成缺陷突变体,从这些备选突变体中找出既能异养又能光合自养的品种,最后选出在异养培养下生长速率快,生物量多且光合自养条件下合成中性油脂和三酰甘油多的淀粉合成缺陷突变体。最终获得的突变株MSA1、MSA5在异养发酵条件下,可快速积累总脂肪酸含量,淀粉产量大幅降低,最终发酵结果,总脂肪酸含量相对于野生型提高5倍~10倍。大幅提高了碳源转化成油脂转化率,可作为工业级别的“产油微藻”,广泛应用于制备生物柴油。 | ||
搜索关键词: | 尖状栅藻 合成 淀粉 缺陷 突变 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种高通量筛选尖状栅藻合成淀粉缺陷型突变株的方法,所述方法包括步骤:a)构建突变株库:尖状栅藻的野生株或起始株经诱变处理得到突变株库;b)高光诱导:在多孔板中培养经诱变处理的野生株或起始株的单克隆藻株,再从孔板的各孔中分别提取适量藻液点到缺氮的已经做好位置标记的固体培养基上,在高光下诱导培养;c)用碘颗粒升华的蒸汽熏固体培养基上的单克隆藻株,将没有颜色变化的单克隆藻株通过其所在的位置标记,追溯到孔板的相应位置查找潜在的合成淀粉缺陷型突变株;d)将淀粉含量低于野生株或起始株的单克隆藻株鉴定为淀粉合成缺陷型的尖状栅藻突变株。
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