[发明专利]一种通过枝干截面愈伤不定芽再生纯化嵌合体获得纯四倍体冬枣植株的方法

摘要

本发明公开了一种通过枝干截面愈伤不定芽再生纯化嵌合体获得纯四倍体冬枣植株的方法，选择健壮沾冬2号冬枣枝干，截枝处理，在截面上放一圈脱脂棉覆盖形成层，用含有细胞分裂素的药剂润湿脱脂棉，用塑料袋包住截口并系紧，12‑14h后，去除覆盖物，并用湿泥覆盖截口，再覆盖塑料布系紧保湿，进行愈伤组织和丛生芽诱导，诱导植株的倍性鉴定，将纯四倍体枣树苗经过继代、生根培养后，移栽入大田纯四倍体种植园；经筛选后选育出优良的四倍体冬枣苗木。本方法生根培养后可直接移栽入大田，可以快速评价田间再生材料，提高了沾冬2号的纯化效率，加速获得纯四倍体冬枣。

主权项

一种通过枝干截面愈伤不定芽再生纯化嵌合体获得纯四倍体冬枣植株的方法，其特征在于步骤如下：（1）从5月中旬到8月中旬选择健壮‘沾冬2号’冬枣枝干，进行截枝处理，在截面上放一圈脱脂棉覆盖形成层，用含有细胞分裂素的药剂润湿脱脂棉，用塑料袋包住截口并系紧，12‑14h后，去除覆盖物，并用湿泥覆盖截口，再覆盖塑料布系紧保湿，进行愈伤组织和丛生芽诱导；（2）诱导植株的倍性鉴定：叶形指数，节间作为指标进行形态学上的鉴定，利用常规压片法鉴定诱导植株的染色体数目，利用荧光显微镜观测保卫细胞叶绿体数目，气轧大小及密度，利用流式细胞仪检测诱导植株细胞的DNA含量，区分为纯四倍体枝条或纯四倍体枣树苗；（3）纯四倍体枣树苗经过继代、生根培养后，移栽入大田纯四倍体种植园；将步骤（2）中得到的纯四倍体枝条采接穗嫁接到性状稳定纯合四倍体优株或优枝上；（4）进行四倍体植株的盆栽抗性试验、大田抗性试验，选择抗性水平高、性状优良的株系，果实品质的测定，从而选育出优良的四倍体冬枣苗木。