[发明专利]一种基于ZnTCPP@MOF的电化学免疫检测微囊藻毒素的方法

摘要

本发明公开了一种基于ZnTCPP@MOF的电化学免疫检测微囊藻毒素的方法。所述方法以卟啉功能化的金属有机框架物ZnTCPP@MOF对电极进行修饰，并利用四辛基溴化铵增加ZnTCPP@MOF在电极上的稳定性，再通过滴加微囊藻毒素MC‑LR抗原及单克隆抗体，组装形成电化学免疫传感器。本发明方法制得的电化学免疫传感器能够实现微囊藻毒素MC‑LR的高灵敏性和高特异性检测，产生的电致化学发光信号稳定，对微囊藻毒素MC‑LR的检测下限低，在生物及环境微囊藻毒素检测领域中具有应用前景。

主权项

1.一种基于ZnTCPP@MOF的电化学免疫检测微囊藻毒素的方法，其特征在于，具体步骤如下：步骤1，ZnTCPP@MOF的制备：将均苯三酸和锌卟啉加入到等体积的无水乙醇和N,N‑二甲基甲酰胺的混合溶剂中，搅拌至分散均匀，加入Cu(NO₃)₂·3H₂O溶液，混合均匀后置于60～120℃进行水热反应，反应结束后，冷却至常温，离心，弃去上清液，真空干燥即得到锌卟啉功能化金属有机框架材料ZnTCPP@MOF；步骤2，传感器组装：按锌卟啉功能化金属有机框架物ZnTCPP@MOF和四辛基溴化铵的质量比为1:1，将ZnTCPP@MOF和四辛基溴化铵溶于甲苯中，将混合溶液滴加到洁净的电极表面，常温下干燥，滴加摩尔比为4:1的EDC/NHS的水溶液对框架物进行羧基活化，淋洗，滴加待检测的微囊藻毒素LR，温育淋洗后滴加抗微囊藻毒素LR单克隆抗体，进行免疫反应，温育淋洗，即组装得到电化学免疫传感器；步骤3，电致化学发光检测：以铂丝电极为对电极，Ag/AgCl电极为参比电极，步骤2中的电极为工作电极，以含有0.1M KNO₃的0.1M，pH 7.4的PBS为电解液，检测ECL信号强度，根据微囊藻毒素LR的浓度和ECL信号的线性关系，计算得到待检测的微囊藻毒素LR的浓度，所述的电致化学发光参数为：光电倍增管偏置电压为1kV，放大级数为3，扫描电位范围为‑1.7～‑0.5V，扫描速率为100mV·s^‑1。