[发明专利]一种重组人IL-24蛋白的PEG修饰方法有效

专利信息
申请号: 201710414629.4 申请日: 2017-06-05
公开(公告)号: CN107118269B 公开(公告)日: 2020-12-01
发明(设计)人: 江红;马群风;郑晓飞;张耀;王俊峰;张驰;史亦南;葛建林;化计磊 申请(专利权)人: 北京交通大学
主分类号: C07K14/54 分类号: C07K14/54;C07K1/107;A61K38/20;A61K47/60;A61P35/00
代理公司: 北京鸿元知识产权代理有限公司 11327 代理人: 陈英俊;许向彤
地址: 100044*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了一种重组人IL‑24蛋白(rhIL‑24)的PEG修饰方法,包括:a.构建人IL‑24的重组原核表达载体,诱导表达,得到包涵体;b.选择变性剂对所述包涵体进行变性,得到变性后的蛋白;c.确定复性条件,对所述变性后的蛋白进行复性,得到复性后的蛋白;d.在对所述复性后的蛋白添加SDS的条件下,进行凝胶过滤纯化,得到纯化后的目的蛋白;e.对所述纯化后的目的蛋白用PEG修饰剂进行定点修饰,得到终产品。该方法在制备高纯度重组人IL‑24蛋白的基础上,利用聚乙二醇进行定点修饰,在修饰蛋白的周围产生空间屏障,减少蛋白的酶解,延长了半衰期,且不影响其体外抑瘤活性,利用率增加,提高了稳定性和生物学活性。
搜索关键词: 一种 重组 il 24 蛋白 peg 修饰 方法
【主权项】:
一种重组人IL‑24蛋白的PEG修饰方法,其特征在于,包括以下步骤:a.构建人IL‑24的重组原核表达载体,诱导表达,得到包涵体;b.选择变性剂,对所述包涵体进行变性,得到变性后的蛋白;c.确定复性条件,对所述变性后的蛋白进行复性,得到复性后的蛋白;d.对所述复性后的蛋白凝胶过滤纯化,得到纯化后的目的蛋白;e.对所述纯化后的目的蛋白用PEG修饰剂进行定点修饰,得到终产品。
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