[发明专利]一种利用番茄斑萎病毒NSm基因进行抗病基因筛选的方法有效
| 申请号： | 201710415015.8 | 申请日： | 2017-06-05 |
| 公开（公告）号： | CN107254477B | 公开（公告）日： | 2020-06-02 |
| 发明（设计）人： | 黄昌军;刘勇;于海芹;童治军;曾建敏;高玉龙 | 申请（专利权）人： | 云南省烟草农业科学研究院 |
| 主分类号： | C12N15/40 | 分类号： | C12N15/40;C12N15/74;C12Q1/18 |
| 代理公司： | 昆明正原专利商标代理有限公司 53100 | 代理人： | 陈左;于洪 |
| 地址： | 650021*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种利用番茄斑萎病毒NSm基因进行抗病基因筛选的方法，属于植物基因克隆技术领域。本发明的NSm基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。通过构建NSm基因的植物表达载体，转化农杆菌，通过和候选抗病基因共浸润本氏烟，观察本氏烟叶片是否产生过敏性坏死的性状，进而对候选抗病基因进行鉴定。该方法能迅速、高通量的进行抗病基因的鉴定，表明基于该基因开发的植物抗病基因筛选的方法具有十分重要的应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 番茄 病毒 nsm 基因 进行 抗病 筛选 方法 | ||
【主权项】：
一种利用番茄斑萎病毒NSm基因进行抗病基因筛选的方法，其特征在于，包括如下步骤：鉴定出番茄斑萎病毒基因组中激发含有抗性位点RTSW的烟草产生抗病反应的无毒基因，该无毒基因是NSm基因，核苷酸序列如SEQ ID No.1 所示；用所述番茄斑萎病毒基因组中的所述无毒基因构建含有所述无毒基因NSm的植物表达载体，并通过农杆菌注渗法将构建好的含有所述无毒基因NSm的植物表达载体导入根癌农杆菌菌株中，之后制得带有所述无毒基因NSm植物表达载体的农杆菌悬液；构建含候选抗病基因的植物表达载体，并将候选抗病基因的植物表达载体导入根癌农杆菌菌株中，之后制得带有候选抗病基因植物表达载体的农杆菌悬液；将带有所述无毒基因NSm植物表达载体的农杆菌悬液和带有候选抗病基因植物表达载体的农杆菌悬液一起注渗到本氏烟叶片脉间，并检测本氏烟叶片的过敏反应。
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