[发明专利]一种基于SANH的共载siRNA和阿霉素的MSR-1磁小体复合物及其制备方法

摘要

本发明公开了一种基于SANH的共载siRNA和阿霉素的MSR‑1磁小体复合物及其制备方法，以具有天然脂质双分子膜层的MSR‑1磁小体为载体材料，利用正常组织、肿瘤微环境和溶酶体pH值的差异，采用pH敏感性腙键合成DOX‑PEI聚合物，再通过静电作用结合BMs和核酸，构建一种pH敏感的共载siRNA和阿霉素的MSR‑1磁小体复合物。该共载复合物进入生物体后，由于EPR效应会在肿瘤组织富集，促进细胞摄取，溶酶体的酸性环境诱发腙键断裂，DOX释放，而PEI的质子海绵效应使得siRNA和DOX安全释放进入细胞质，siRNA进一步发挥基因沉默效应的同时，DOX插入DNA片段中，起到协同治疗作用，具有广泛的应用前景。

主权项

一种基于SANH的共载siRNA和阿霉素的MSR‑1磁小体复合物的制备方法，其特征在于：包括：1)将浓度为18～22mg/mL的SANH储备液和PEI按照质量比1:4～6的比例共同加入到pH 7.3～7.5的修饰缓冲液中，室温下在氮气保护下反应46～50h；将反应得到的产物放入截留分子量为8000～14000的透析袋中透析46～50h，保留液冷冻干燥，得到SANH‑PEI；2)将DOX·HCl和步骤1)得到的SANH‑PEI按照质量比1:3～5的比例共同溶解在pH5.9～6.1的连接缓冲液中，室温下在氮气保护下避光反应46～50h；将反应得到的产物放入截留分子量为8000～14000的透析袋中透析46～50h，保留液冷冻干燥，得到DOX‑PEI；3)将步骤2)得到的DOX‑PEI与siRNA按照质量比1～2.6:1混合，随后将BMs悬液滴加于上述DOX‑PEI和siRNA的混合物中，并使BMs悬液中的BMs与DOX‑PEI和siRNA的混合物中的siRNA的质量比为1～5:1～5；所述BMs来源于Magnetospirillum gryphiswaldense MSR‑1趋磁细菌；然后旋涡振荡1～3min，室温静置20～30min，得到共载siRNA和阿霉素的MSR‑1磁小体复合物。