[发明专利]一种海南三七根茎芽基部诱导再生植株的方法

摘要

本发明公开了一种海南三七根茎芽基部诱导再生植株的方法，属于植物诱导再生技术领域。该方法将海南三七根茎芽前处理后，切掉根茎芽上的叶片和茎尖，留芽基部为外植体；将消毒好的外植体接种到诱导培养基上培养，直至外植体基部形成丛生芽；当初代芽基部丛生芽长至4～6cm时，切下芽，截取芽基部1.0‐1.5cm接种到增殖培养基中诱导丛生芽；再切下丛生芽转移至生根培养基上进行生根，当生根培养基上的苗高5～8cm时，在温室自然光照下炼苗7～10d，取出苗，洗净根部培养基，培养后得到移栽苗。本发明显著提高海南三七的组培繁殖效率。

主权项

一种海南三七根茎芽基部诱导再生植株的方法，其特征在于包括以下步骤：(a)外植体前处理：采集海南三七的根茎用自来水清洗干净，剪掉根茎上的贮藏根和须根后，消毒后晾干；再放入洗净消毒的河沙中，恒温发芽，洗净根茎芽，取其芽基部为外植体材料；(b)丛生芽诱导：将消毒好的外植体接种到诱导培养基上培养，直至外植体基部形成丛生芽；所述的诱导培养基成分为MS、6‐苄氨基腺嘌呤1.0～3.0mg/L、萘乙酸0.01～0.10mg/L、椰汁10.0～15.0％、蔗糖20～30g/L、卡拉胶粉9.5～10.0g/L；(c)增殖继代：当初代芽基部丛生芽长至4～6cm时，切下芽，截取芽基部1.0‐1.5cm接种到增殖培养基中诱导丛生芽；所述增殖继代培养基成分为MS、6‐苄氨基腺嘌呤3.0～8.0mg/L、萘乙酸0.05～0.10mg/L、椰汁10.0～15.0％、蔗糖20～30g/L、卡拉胶粉9.5～10.0g/L；(d)生根培养：当继代苗高4～7cm时，切下接种到生根培养基中，所述生根培养基成分为MS、萘乙酸0.10～0.50mg/L、香蕉泥10.0～15.0％、活性炭1.0～1.5g/L、蔗糖20～30g/L、卡拉胶粉9.5～10.0g/L；(e)炼苗移栽：当生根培养基上的苗高5～8cm时，在温室自然光照下炼苗7～10d，取出瓶苗，洗净根部培养基，百菌清溶液消毒后，移栽到进口泥炭的基质中，保持通风透气，湿度在70～85％，温度在20～32℃，自然光照条件培养后得移栽苗。