[发明专利]庆大霉素苯乙醛混配杀线虫剂及其制备方法

摘要

本发明涉及一种庆大霉素苯乙醛混配杀线虫剂及其制备方法。庆大霉素苯乙醛混配杀线虫剂的制备方法包括制备海洋放线菌液态发酵培养基、发酵培养、发酵液处理和制备杀线虫剂。本发明利用苯乙醛对松材线虫具有活性和单独使用的效果差的特点，将苯乙醛与微生物混合培养，改变微生物生长环境，改变其次级代谢产物，进而增强了其杀线活性。利用本发明的方法制备的庆大霉素苯乙醛混配杀线虫剂，可用于防治植物线虫。

主权项

一种庆大霉素苯乙醛混配的杀线虫剂的制备方法，其特征在于步骤如下：（1）制备海洋放线菌液态发酵培养基：在1000 ml的水中加入可溶性淀粉20g、 酵母粉5g、K2HPO4·3H2O 0.58g、 NaCl 0.81g、MgSO4· 7H2O 0.72g、 CaCO3 0.28g、FeSO4·7H2O 0.01g、10% 的苯乙醛200ul、重量比为 0.03%的无菌庆大霉素3ml，调pH 7.2‑7.5；所述10% 苯乙醛，指苯乙醛与水的体积比为10%；（2）发酵培养：按体积比为6%的接种量，在步骤（1）的培养基中接种海洋放线菌菌株EX‑10‑2711，培养温度32℃，转速145 rpm，发酵时间96 h，获得发酵液；（3）发酵液处理：将步骤（2）的发酵液，分装于无菌50ml大离心管中，离心1‑3次，每次5000 rpm/min离心10min，分离获得上清和沉淀；a) 上清，4℃保存备用；b) 沉淀，用无菌水洗涤3次后，将离心洗涤后的细胞团与3倍体积的无菌1% NaCl溶液混匀，于560W和工作时间/间隔时间是5s的条件下，在超声波破碎仪中冰浴破碎5min，破碎后5000rpm 离心10min去沉淀，取上清液，4℃保存备用；所述1% NaCl溶液，为NaCl与水的重量比为1%的 NaCl溶液；（4）制备杀线虫剂：合并步骤（3）两次获得的上清液，即为庆大霉素苯乙醛混配的杀线虫剂。