[发明专利]从鱼鳞中同时提取并分离活性成分的方法

摘要

本发明公开了一种从鱼鳞中同时提取并分离活性成分的方法，以鱼鳞为原料，将鱼鳞中的鸟嘌呤、胶原蛋白肽和胶原蛋白同时进行提取，再控制提取液的浓度和酸度及温度，依次将胶原蛋白、鸟嘌呤和胶原蛋白肽进行分离；本发明方法以鱼鳞为原料，一步提取并分离胶原蛋白、胶原蛋白肽和鸟嘌呤，工艺简便，充分利用了鱼鳞自然资源，克服了目前技术中的单一提取的技术缺陷，具有明显的社会价值和经济效益。

主权项

1.从鱼鳞中同时提取并分离活性成分的方法，以鱼鳞为原料，将鱼鳞中的鸟嘌呤、胶原蛋白肽和胶原蛋白同时进行提取，再控制提取液的浓度和酸度及温度，依次将胶原蛋白、鸟嘌呤和胶原蛋白肽进行分离；其特征是它的具体步骤如下: 对洗净和除杂质的鱼鳞经过冷冻干燥后，粉碎成丝状鱼鳞；将丝状鱼鳞按照一定的固液比与提取溶剂混合后，置于超声装置中，在设置的超声功率、温度和超声时间下进行提取，离心分离去不溶物，得含有鸟嘌呤、胶原蛋白肽和胶原蛋白的混合提取液；将混合提取液置于旋转蒸发装置中进行浓缩得到浓缩液；浓缩液置于低温下静置至出现沉淀和清液后，过滤得到沉淀A和清液B；沉淀A用去离子水洗涤至无氯离子后冷冻干燥得白色物C；将清液B通过碱性溶液调节至一定pH值后，在低温下静置一定时间，过滤及用去离子水洗涤至无氯离子后得到白色沉淀D和澄清溶液E，白色沉淀D被冷冻成白色粉末状D；澄清溶液E继续用碱性溶液调节至一定pH值后，浓缩，在低温下静置一定时间，过滤分离得沉淀F和滤液G，沉淀F经洗涤、冷冻干燥后为无色物F，滤液G被浓缩后直接冷冻干燥得白色粉末G；白色物C、白色粉末状D的红外与标准牛血清蛋白红外图完全一致，且不溶于水，易溶于盐酸，证明两种物为胶原蛋白；无色物F的红外与标准鸟嘌呤基本一致，不溶于水，证明为不纯的鸟嘌呤；白色粉末G极易溶于水，也极易溶于酸，红外图和标准牛血清胶原蛋白一致，标明为含有盐的水溶性胶原蛋白肽；所述 混合提取液的提取过程是：将丝状鱼鳞按照质量数与0.050～0.82 mol/L浓度的盐酸溶液体积按照1g:10~19mL比混合后，置于超声装置中，功率35～71%、时间20~40分钟和温度30 ℃ 进行提取；离心分离去不溶物，得含有鸟嘌呤、胶原蛋白肽和胶原蛋白的混合提取液；所述的浓缩过程是：混合提取液6000 r/min离心20min，得滤液，滤液经旋转蒸发浓缩得浓缩液；所述胶原蛋白的分离是：浓缩液置于0 ℃ ~10 ℃ 静置过夜后，过滤分离，得到沉淀A和清液B；沉淀A用去离子水洗涤至无氯离子后在冻干机中冷冻干燥得白色物C；清液B用0.5~1mol/L 的氢氧化钠调节pH值为6.0~6.5后，同样是在0 ℃ ~10 ℃ 低温静置过夜后，通过定量滤纸过滤及去离子水洗涤，得到白色沉淀D和澄清溶液E，白色沉淀D被冷冻成白色粉末状D；白色物C、白色粉末状D的红外与标准牛血清蛋白红外图完全一致，且不溶于水，易溶于盐酸，证明两种物为胶原蛋白；所述鸟嘌呤的分离是：通过定量滤纸过滤白色沉淀D后所得的澄清溶液E用0.05~0.2mol/L氢氧化钠调节pH值为7.0‑7.5后，浓缩，在0℃ ~10℃ 低温静置过夜至有清液和沉淀，过滤分离得沉淀F和滤液G，沉淀F经水洗涤，冷冻干燥后为无色物F；无色物F的红外与标准鸟嘌呤基本一致，不溶于水，证明为不纯的鸟嘌呤；所述胶原蛋白肽的分离是：过滤分离得沉淀F后的滤液G，旋转蒸发至无水蒸出，再在低温冰箱中结冰后在冷冻干燥机中冻干得白色粉末G；白色粉末G极易溶于水，也极易溶于酸，红外图和标准牛血清胶原蛋白一致，标明为含有盐的水溶性胶原蛋白肽。