[发明专利]一种基于树干毕赤酵母合成菌株发酵木糖生产衣康酸的构建方法有效
| 申请号： | 201710470716.1 | 申请日： | 2017-06-20 |
| 公开（公告）号： | CN107338263B | 公开（公告）日： | 2020-12-29 |
| 发明（设计）人： | 张雷;齐海山;杜岩 | 申请（专利权）人： | 天津大学 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N15/66;C12R1/84 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人： | 王丽 |
| 地址： | 300072 天*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明提供一株发酵木糖生产衣康酸的树干毕赤酵母合成菌株及构建方法。采用树干毕赤酵母Pichia stipitis FPL‑UC7为宿主，异源表达经密码子优化的来自土曲霉的顺乌头酸脱羧酶基因CAD，进一步过表达树干毕赤酵母的细胞质顺乌头酸酶基因ACO，获得了优化的树干毕赤酵母衣康酸合成菌株；将获得的合成菌株进行3L发酵罐补料发酵木糖实验，发酵5‑7天，衣康酸产量达到1.5g/L。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 树干 酵母 合成 菌株 发酵 生产 衣康酸 构建 方法 | ||
【主权项】：
一种基于树干毕赤酵母合成菌株发酵木糖生产衣康酸的构建方法；其特征在于：以树干毕赤酵母Pichia stipitis FPL‑UC7为宿主菌株，异源表达CAD基因和过表达ACO基因，构建获得发酵木糖生产衣康酸工程菌株，其构建步骤如下：(1)密码子优化土曲霉CAD基因，并进行全基因合成；(2)设计树干毕赤酵母定位细胞质的ACO基因引物；(3)以树干毕赤酵母FPL‑UC7基因组DNA为模板，扩增ACO基因片段；(4)建立连入CAD和ACO编码基因的过表达载体pY26TEF‑GPD‑IA1；(5)电转化过表达载体pY26TEF‑GPD‑IA1到树干毕赤酵母FPL‑UC7感受态细胞，对转化菌株进行木糖补料发酵实验。
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