[发明专利]血液基因组DNA提取方法在审
申请号: | 201710473677.0 | 申请日: | 2017-06-21 |
公开(公告)号: | CN107245486A | 公开(公告)日: | 2017-10-13 |
发明(设计)人: | 唐笑;贺乐;刘岱璿;周梅华;代冰;彭兴旺;田倩;何媛 | 申请(专利权)人: | 长沙金域医学检验所有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 410205 湖南省长沙市高*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明提供一种血液基因组DNA提取方法。所述血液基因组DNA提取方法包括提取血液样本、加入至预混液、升温颠倒混匀、混合液瞬时离心等步骤。本发明提供的所述血液基因组DNA提取方法解决了现有技术的DNA提取方法费时费力,耗材消耗量大的技术问题。 | ||
搜索关键词: | 血液 基因组 dna 提取 方法 | ||
【主权项】:
一种血液基因组DNA提取方法,运用所述血液基因组DNA提取方法需使用血液基因组DNA提取试剂盒,所述血液基因组DNA提取试剂盒包括以下组分:缓冲液GB、缓冲液BD、缓冲液GDB、漂洗液PWB、洗脱缓冲液TB、蛋白酶K、吸附柱、收集管、离心管;其特征在于,所述血液基因组DNA提取方法包括以下步骤:步骤1:提取200μL的血液样本;步骤2:将200μL所述缓冲液GB和20μL所述蛋白酶K组合为预混液,将所述血液样本加入至所述预混液中,充分振荡混匀,获得第一混合液;步骤3:所述第一混合液于56℃下放置一定时间,同时颠倒混匀,直至所述第一混合液变为清亮液体;步骤4:将所述第一混合液于室温下放置2‑5min,加入350μL所述缓冲液BD,充分颠倒混匀后瞬时离心,获得第二混合液;步骤5:所述第二混合液加入至所述吸附柱中,所述吸附柱置入所述收集管中,于12000rpm下离心30sec,取出所述吸附柱,倒掉所述收集管中的废液,并将所述吸附柱放回所述收集管;步骤6:向所述吸附柱中加入500μL所述缓冲液GDB,于12000rpm下离心30sec,取出所述吸附柱,倒掉所述收集管中的废液,并将所述吸附柱放回所述收集管;步骤7:向所述吸附柱中加入600μL所述漂洗液PWB,于12000rpm下离心30sec,取出所述吸附柱,倒掉所述收集管中的废液,并将所述吸附柱放回所述收集管;步骤8:向所述吸附柱中加入550μL所述漂洗液PWB,于12000rpm下离心2.5min,取出所述吸附柱,倒掉所述收集管中的废液,将所述吸附柱置入所述离心管中;步骤9:打开所述吸附柱的盖子,于室温下放置2min;步骤10:于所述吸附柱的吸附膜中间位置悬空滴加50‑200μL所述洗脱缓冲液TB,室温放置2min后,于12000rpm下离心2min,于所述离心管中获得检测样本。
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