[发明专利]一种肿瘤靶向双载药纳米载体的制备方法

摘要

本发明公开了一种肿瘤靶向双载药纳米载体及其制备方法。本发明所述的肿瘤靶向双载药纳米载体，是由聚己内酯、聚酰胺‑胺型树枝状高分子、聚乙二醇与多肽组装而成的阳离子型聚合物纳米载体；其能够同时将化疗药物和基因药物靶向运送至肿瘤组织中，并具有药物包封率高、肿瘤靶向性强、细胞毒性低等优点。

主权项

1.一种肿瘤靶向双载药纳米载体的制备方法，其特征在于，具体包括以下操作步骤：1)制备具有双硫键的双羟基聚己内酯：将具有双硫键的胱胺和ε‑己内酯溶解于干燥的甲苯中，在无水无氧条件下缓慢滴加入催化剂异辛酸亚锡，滴加完后在氮气环境中110℃下冷凝回流反应18h，反应过程中磁力搅拌，反应结束后除去未反应的甲苯，再用冷乙醚沉淀，干燥，得到具有双硫键的双羟基聚己内酯；其中，所述的胱胺、ε‑己内酯与催化剂的摩尔比为1:(100～200):(0.05～0.1)；所述的胱胺在反应体系中的浓度为5～20mg/mL；所述的冷乙醚与反应体系溶液的体积比为(10～20):1；2)制备丙烯酸酯封端的双羟基聚己内酯：将三乙胺、丙烯酰氯分别溶于干燥的甲苯中，将步骤1)制得的双羟基聚己内酯置于冰浴中，然后在避光、真空及氮气保护下依次缓慢滴加三乙胺和丙烯酰氯的甲苯溶液，滴加完后在氮气环境中80℃冷凝回流反应8h，反应过程中磁力搅拌，反应结束后过滤除去三乙胺盐酸盐结晶，滤液在过量的冷正己烷中沉淀，抽滤，干燥，得到丙烯酸酯封端的双羟基聚己内酯；其中，所述的双羟基聚己内酯与丙烯酰氯、三乙胺的摩尔比为1:(4.2～10):(4.2～10)；所述的双羟基聚己内酯在反应体系中的浓度为10～50mg/mL；所述的冷正己烷与反应体系溶液的体积比为(5～10):1；3)制备聚己内酯‑聚(酰胺‑胺)聚合物：将聚酰胺‑胺型树枝状高分子和步骤2)制得的双羟基聚己内酯分别溶于氯仿中，将双羟基聚己内酯的氯仿溶液滴加入聚酰胺‑胺型树枝状高分子的氯仿溶液中，在真空及氮气保护下55℃冷凝回流反应24h，反应过程中磁力搅拌，反应结束后在三氯甲烷中进行透析处理，再用过量的冷石油醚沉淀，将所得到的白色沉淀用二氯甲烷溶解后缓慢滴加到去离子水中搅拌过夜，挥发有机溶剂后，冷冻干燥，得到聚己内酯‑聚(酰胺‑胺)聚合物；其中，所述的聚酰胺‑胺型树枝状高分子与双羟基聚己内酯的摩尔比为(4～10):1；所述的双羟基聚己内酯在反应体系中的浓度为0.8～8mmol/L；所述透析处理的截留分子量为8000～14000；所述的冷乙醚与反应体系溶液的体积比为(2～10):1；4)制备所述的肿瘤靶向双载药纳米载体：将步骤3)制得的聚己内酯‑聚(酰胺‑胺)聚合物溶于磷酸盐缓冲液中，调节pH值至7.8～8.2，加入双嵌段聚乙二醇，在室温下搅拌反应12h，制得聚己内酯‑聚(酰胺‑胺)‑聚乙二醇聚合物；将所得的聚己内酯‑聚(酰胺‑胺)‑聚乙二醇聚合物溶于磷酸盐缓冲液中，调节pH值至6.0～7.0，加入多肽的磷酸盐缓冲液，在室温下搅拌反应2h，反应结束后进行超滤处理，冷冻干燥，得到所述的肿瘤靶向双载药纳米载体；其中，所述的双嵌段聚乙二醇是末端基团为马来酰亚胺基和N‑羟基丁二酰亚胺基的双嵌段聚乙二醇；所述的双嵌段聚乙二醇与步骤3)的双羟基聚己内酯的摩尔比为(1～10):1；所述的聚己内酯‑聚(酰胺‑胺)聚合物在反应体系中的浓度为8～80mmol/L；所述的多肽与聚己内酯‑聚(酰胺‑胺)‑聚乙二醇聚合物的质量比为1:(1～5)；所述的多肽在反应体系中的浓度为0.5～2.5mg/mL。