[发明专利]基于牛BAF60c基因位点突变评估牛奶品质的方法

摘要

本发明公开了一种基于牛BAF60c基因位点突变评估牛奶品质的方法，该方法通过从生鲜牛奶中提取DNA，PCR扩增牛BAF60c基因的特异引物，酶切判定其中TC突变的基因型，然后评估该牛奶的乳糖、乳蛋白和脂蛋白比等指标，从而根据不同基因型来判定不同品质的牛奶。本发明通过检测和判断牛BAF60c基因中功能性突变位点的基因型，从而预测和评估牛奶品质，进行生鲜奶的分级，筛选品质好的生鲜奶，为牛奶品质的检测与评价提供了一种新方法，也为企业生产高品质奶产品提供参考，应用前景广阔，对于牛奶的营养品质检测具有重要的意义。

主权项

一种基于牛BAF60c基因位点突变评估牛奶品质的方法，其特征在于它由以下步骤组成：(1)采集生鲜牛奶样品，并从中提取牛基因组DNA；(2)设计并合成牛BAF60c基因的特异性引物：上游引物：5'‑GTT ACC TGC CCT GAA TGT GG‑3'；下游引物：5'‑AGG ACA CCT GGA GAG ACC TG‑3'；(3)采用步骤(1)提取的牛基因组DNA为模板，对步骤(2)中的特异性引物进行PCR扩增；(4)将步骤(3)中的PCR扩增产物用Alu I限制性内切酶进行酶切，然后采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对酶切产物进行检测，根据电泳结果中的条带，判断T6060C位点的基因型，其中出现65bp、81bp和121bp三条带被判定为TT基因型，出现65bp、81bp、121bp和186bp四条带被判定为TC基因型，出现81bp、121bp和186bp三条带被判定为CC基因型；(5)根据T6060C位点的基因型来评估牛奶乳糖含量、乳蛋白含量和脂蛋比，如果基因型为TT型，该样品的乳糖含量为5.02％～5.06％、乳蛋白含量为2.98％～3.02％、脂蛋比为1.37～1.41；如果基因型为TC型，样品的乳糖含量为5.00％～5.06％、乳蛋白含量为2.84％～2.90％、脂蛋比为1.28～1.36；如果基因型为CC型，样品的乳糖含量为5.22％～5.32％、乳蛋白含量为3.22％～3.32％、脂蛋比为1.42～1.50。