[发明专利]一种快速测定鸡蛋中磺胺类和喹诺酮类药物残留的方法

摘要

本发明公开了一种快速测定鸡蛋中磺胺类和喹诺酮类药物残留的方法，它涉及鸡蛋样品检测技术领域。其步骤为：将鸡蛋样品用2%甲酸乙腈8mL提取，再加入pH7.0、0.1mol/L的EDTA缓冲液0.5mL震荡，用QuEChERS EMR‑Lipid快速样品提取技术净化，最后用0.2%甲酸溶液和乙腈溶液作为流动相进行梯度洗脱，应用电喷雾离子源的动态多反应监测对30种磺胺类药物和喹诺酮类药物进行定性和定量分析。本发明前处理简单易行，便于操作，方法精密度高，可以满足对鸡蛋中磺胺类药物和喹诺酮类药物快速、准确的检测要求，适合大批量样品的准确定性和定量分析。

主权项

1.一种快速测定鸡蛋中磺胺类和喹诺酮类药物残留的方法，其特征在于，其步骤为：(1)准备材料与试剂：QuEChERS EMR‑Lipid快速萃取管，HPLC纯试剂：乙腈、甲醇、甲酸，蒸馏水，以及目标分析物：磺胺噻唑(ST)、磺胺二甲异恶唑(SIZ)、磺胺多辛(SDM’)、磺胺甲基嘧啶(SM1)、磺胺氯哒嗪(SCP)、磺胺吡啶(SPD)、磺胺甲噻二唑(SMT)、磺胺甲氧哒嗪(SMP)、磺胺嘧啶(SD)、磺胺间甲氧嘧啶(SMM)、磺胺地索辛(SDM)、磺胺甲恶唑(SMZ)、磺胺喹恶啉(SQ)、磺胺二甲嘧啶(SM2)、麻保沙星、洛美沙星、培氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、氧氟沙星、二氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、达氟沙星、吡哌酸、恶喹酸(奥索利酸)、依诺沙星(氟啶酸)、萘啶酸、氟甲喹、西诺沙星；(2)样品提取净化：准确称取5g鸡蛋样品，加入2％甲酸乙腈8mL，漩涡震荡1min，再加入pH7.0、0.1mol/L的EDTA缓冲液0.5mL，漩涡震荡1min，10000r/min离心3min，将上清液转移至QuEChERS EMR‑Lipid快速萃取提取管中，剧烈震荡1min，10000r/min离心3min，将上清液转移至QuEChERS EMR‑Lipid反萃取管中，剧烈震荡1min，10000r/min离心3min，吸取1mL上清液到样品瓶中，50℃下氮气吹至近干；所述的上清液转移至QuEChERS EMR‑Lipid快速萃取提取管前需用pH2.4、0.1mol/L的乙酸铵溶液5mL活化；(3)上机测定：浓缩液用0.2％甲酸乙腈溶液定容至1.0mL，涡旋混匀，过0.22μm过滤膜转移至进样瓶中上机检测；(4)仪器条件：色谱条件：色谱柱：Agilentporoshell EC‑C18柱，2.1mm×100mm，2.7μm；流动相：A相为0.2％甲酸溶液，B相为乙腈溶液；梯度洗脱程序：0～0.5min，4％B；0.5～4.5min，4％B～8％B；4.5～5min，8％B；5～10min，8％B～18％B；10～13min，18％B～40％B；13～13.4min，40％B～70％B；13.4～13.5min，70％B～90％B；B瞬时变化为10％，并保持2min；流速：0.4ml/min；进样量：5.0μL；质谱条件：电喷雾离子源，正离子扫描，动态多反应监测，碰撞能量为380V，雾化气压力为50psi，毛细管压力4000V，干燥气流速10l/min，干燥气温度350℃；各目标分析物的质谱参数为；(5)标准溶液的配制与标准曲线、检测限与定量限测定：根据标准品的实际含量换算标准品的实际称重量，分别准确称取各标准品，置于相应容量瓶中，以10ml水溶解，并用0.1％甲酸乙腈定容至刻度，其中恶喹酸10ml水加1.5ml氨水溶解，再用0.1％甲酸乙腈定容，即成100.00μg/mL的标准储备液，4℃冰箱中避光保存，临用前可将其用流动相稀释至工作浓度标准溶液；配置一系列浓度的混标溶液，用处理好的空白样品基质，配制0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0ng/mL标准工作溶液，上机检测获得基质标准曲线，数据处理获得线性相关系数，按3倍信噪比计算方法检测限，10倍信噪比计算方法定量限；(6)添加回收率、精密度测定：准确称取5.00g鸡蛋样品，分别添加标准溶液混合溶液8、16、32μg/kg浓度，每个添加浓度做6个平行样品，按上述方法进行处理分析，计算回收率和相对标准偏差。