[发明专利]利用CRISPR-CAS9技术敲除NRK细胞Slc22a2基因的方法有效
申请号: | 201710496608.1 | 申请日: | 2017-06-26 |
公开(公告)号: | CN107177631B | 公开(公告)日: | 2020-11-24 |
发明(设计)人: | 许文涛;罗云波;祁潇哲;黄昆仑;朱丽叶;贺晓云 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N5/10;C12N15/113 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君;黄爽 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供一种利用CRISPR‑CAS9技术敲除NRK细胞Slc22a2基因的方法。根据大鼠Slc22a2基因序列,构建基于CRISPER‑Cas9系统的gRNA表达载体,以此作为Slc22a2基因打靶载体,转入NRK细胞中,获得Slc22a2基因敲除的NRK细胞,其可作为理想的细胞模型,模拟人体肾脏环境中OCT2蛋白的缺失,用于研究OCT2蛋白在药物、毒素以及其他小分子物质转运方面的应用。 | ||
搜索关键词: | 利用 crispr cas9 技术 nrk 细胞 slc22a2 基因 方法 | ||
【主权项】:
Slc22a2基因打靶载体,其特征在于,所述打靶载体是基于CRISPR/Cas9系统的gRNA表达载体,gRNA作用位点位于大鼠Slc22a2基因的2号外显子上,gRNA作用位点的DNA序列为5′‑TTTCAGTCAGTAGTGAACGT‑3′。
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