[发明专利]一种CYP2C19*2基因型检测试剂盒及其检测方法

摘要

一种CYP2C19*2基因型检测试剂盒及其检测方法，特征在于包括KOD DNA 聚合酶、上游引物、下游引物、特异性靶向荧光探针、GG型阳性参考品、AA型阳性参考品以及GA型阳性参考品；GG纯合型DNA序列是以人CYP2C19*2基因681位点GG型为模板而设计的一段线性重组DNA序列；AA纯合型DNA序列是以人CYP2C19*2基因681位点AA型为模板而设计的一段线性重组DNA序列；GA型阳性参考品是通过GG型阳性参考品与AA型阳性参考品按等体积混合配制而成。本发明的检测方法能够快速、简便地检测CYP2C19基因上CYP2C19*2位点的变异。

主权项

一种CYP2C19*2基因型检测试剂盒，其特征在于：包括KOD DNA 聚合酶、上游引物、下游引物、特异性靶向荧光探针、GG型阳性参考品、AA型阳性参考品以及GA型阳性参考品；所述上游引物为针对人CYP2C19*2基因设计的上游引物，上游引物的序列为5’‑ACCAGAGCTTGGCATATTGTATCTATACC‑3’；所述下游引物为针对人CYP2C19*2基因设计的下游引物，下游引物的序列为5’‑CCAAAATATCACTTTCCATAAAAGCAAG‑3’；所述特异性靶向荧光探针是带有人CYP2C19*2基因的特异性配对序列的探针，其碱基序列为5’‑TTGATTATTTCCCAGGAACC‑3’， 荧光染料为氟硼二吡咯；所述GG型阳性参考品是一种以GG纯合型DNA序列为主要成分的溶液，所述GG纯合型DNA序列是以人CYP2C19*2基因681位点GG型为模板而设计的一段线性重组DNA序列，GG纯合型DNA序列为5’‑TTACAACCAGAGCTTGGCATATTGTATCTATACCTTTATTAAATGCTTTTAATTTAATAAATTATTGTTTTCTCTTAGATATGCAATAATTTTCCCACTATCATTGATTATTTCCCGGGAACCCATAACAAATTACTTAAAAACCTTGCTTTTATGGAAAGTGATATTTTGGAGAAAGTA‑3’，其中，带有下划线的碱基位点是人CYP2C19*2基因的681位点，所述681位点用于表征人CYP2C19*2基因的GG型可突变为人CYP2C19*2基因的AA型的位置；所述AA型阳性参考品是一种以AA纯合型DNA序列为主要成分的溶液，所述AA纯合型DNA序列是以人CYP2C19*2基因681位点AA型为模板而设计的一段线性重组DNA序列，AA纯合型DNA序列为5’‑TTACAACCAGAGCTTGGCATATTGTATCTATACCTTTATTAAATGCTTTTAATTTAATAAATTATTGTTTTCTCTTAGATATGCAATAATTTTCCCACTATCATTGATTATTTCCCAGGAACCCATAACAAATTACTTAAAAACCTTGCTTTTATGGAAAGTGATATTTTGGAGAAAGTA‑3’，其中，带有下划线的碱基位点是人CYP2C19*2基因的681位点，所述681位点用于表征人CYP2C19*2基因的GG型可突变为人CYP2C19*2基因的AA型的位置；所述GA型阳性参考品是通过所述GG型阳性参考品与AA型阳性参考品按等体积混合配制而成，所述GG型阳性参考品含有的GG纯合型DNA序列的浓度等于所述AA型阳性参考品含有的AA纯合型DNA序列的浓度。