[发明专利]线粒体耳聋C1494T突变的荧光定量PCR检测试剂盒及其应用

摘要

本发明提供一种线粒体耳聋常见突变C1494T的荧光定量PCR检测试剂盒，包含定量PCR反应液、第一阳性对照品、第二阳性对照品、阴性对照品、说明书和盒体，其中定量PCR反应液含有PCR缓冲液、MgCl2、dNTPs、耐热DNA聚合酶、上游扩增引物、下游扩增引物、第一荧光探针和第二荧光探针。本发明提供的试剂盒，针对mtDNA第1494位点的C>T单碱基突变设计两条MGB探针，通过荧光定量PCR对耳聋相关性的线粒体第1555位核苷酸进行检测，明确该位点是否发生C>T突变，具有简便、快速、准确等优点，可应用于线粒体C1494T突变相关性耳聋的临床诊断和防治，也为C1494T突变导致的线粒体耳聋的预防和治疗提供依据。

主权项

一种线粒体耳聋C1494T突变的荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，由定量PCR反应液、第一阳性对照品、第二阳性对照品、阴性对照品、说明书和盒体组成，其中定量PCR反应液含有PCR缓冲液、MgCl2、dNTPs、耐热DNA聚合酶、上游扩增引物、下游扩增引物、第一荧光探针和第二荧光探针；上游扩增引物序列为：5’‑GCCCTGAAGCGCGTACAC‑3’下游扩增引物序列为：5’‑CCATGTTACGACTTGTCTCCTCTATATAA‑3’第一荧光探针序列为：5’‑FAM‑CCGTCACTCTCCT‑MGB‑3’第二荧光探针序列为：5’‑HEX‑CCGTCACCCTCCT‑MGB‑3’。