[发明专利]一种LAMP防污染的方法在审
| 申请号： | 201710530484.4 | 申请日： | 2017-06-30 |
| 公开（公告）号： | CN109207563A | 公开（公告）日： | 2019-01-15 |
| 发明（设计）人： | 马翠萍;王富鑫;石超;井豪;韩灵芝;张美玲 | 申请（专利权）人： | 青岛科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6844 | 分类号： | C12Q1/6844 |
| 代理公司： | 青岛中天汇智知识产权代理有限公司 37241 | 代理人： | 刘晓娟;万桂斌 |
| 地址： | 266000 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种LAMP防污染的方法，具体包括如下步骤：(1)设计LAMP的两条内引物含有限制性核酸内切酶的识别序列；(2)将步骤(1)中的内引物与LAMP的外引物及扩增靶标杂交，并加入聚合酶和限制性核酸内切酶，将混合物孵育一段时间，消除反应管中的污染物；(3)将混合物在高温条件下孵育一段时间，灭活反应管中的限制性核酸内切酶；(4)将混合物置于适宜温度进行反应，最终得到大量的扩增产物。利用限制性核酸内切酶对DNA双链切割的特点，将因污染而进入LAMP反应管中的含有限制性核酸内切酶的识别序列的上一次LAMP产物进行切割，使引物不能与污染产物进行结合，从而避免污染。 | ||
| 搜索关键词： | 限制性核酸内切酶 混合物 防污染 内引物 切割 混合物孵育 避免污染 高温条件 扩增产物 污染产物 消除反应 反应管 聚合酶 外引物 靶标 孵育 扩增 灭活 引物 污染物 杂交 污染 | ||
【主权项】：
1.一种LAMP防污染的方法，其特征在于，具体包括如下步骤：(1)设计LAMP的两条内引物含有限制性核酸内切酶的识别序列；(2)将步骤(1)中的内引物与LAMP的外引物及扩增靶标杂交，并加入聚合酶和限制性核酸内切酶，将混合物孵育一段时间，消除反应管中的污染物；(3)将混合物在高温条件下孵育一段时间，灭活反应管中的限制性核酸内切酶；(4)将混合物置于适宜温度进行反应，最终得到大量的扩增产物。
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