[发明专利]一种枸杞多糖精制的方法

摘要

本发明属于枸杞多糖分离纯化技术领域，具体公开了一种枸杞多糖精制的方法，经水提、醇沉、透析、冷冻干燥得枸杞粗多糖，再经8‑14KDa透析袋透析得到大分子、小分子枸杞多糖，将大分子枸杞多糖依次用体积分数30％、50％、70％的乙醇溶液进行梯度沉淀，收集不同梯度的沉淀，冷冻干燥，得到初级纯化的三个枸杞多糖组分，然后分别经Sephadex G‑100柱层析分离纯化，得到三个高纯度枸杞多糖组分LBGP‑I‑1、LBGP‑I‑2和LBGP‑I‑3。LBGP‑I‑1单糖组成以葡萄糖为主；LBGP‑I‑2单糖组成以葡萄糖和半乳糖为主；LBGP‑I‑3单糖组成以阿拉伯糖和半乳糖为主。LBGP‑I‑1和LBGP‑I‑2单糖组成不同于传统方法纯化所得多糖。本发明的方法整个操作步骤简单，成本低，得率高，得到结构组成不同的枸杞多糖组分，适用于枸杞多糖的大规模工业化生产。

主权项

一种枸杞多糖精制的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，枸杞多糖的提取步骤1.1，将枸杞子粉碎后，室温浸泡于相当于枸杞子重量3倍体积的蒸馏水中，浸泡24h，离心，收集上清液，浓缩，向浓缩液中加入无水乙醇沉淀，离心，收集沉淀物；步骤1.2，向所述沉淀物中加入蒸馏水，得到复溶液；然后向复溶液中加入相当于复溶液1/5体积的Sevage试剂，300r/min搅拌15min，离心，收集上清液；步骤1.3，重复步骤1.2的操作数次直至无沉淀，将最后一次上清液用玻璃纸透析，收集袋内溶液，冷冻干燥，得到枸杞粗多糖；步骤1.4，将枸杞粗多糖用蒸馏水复溶后，再用截留分子量为8‑14KDa的透析袋透析，收集透析袋内透析液，离心，收集上清液冷冻干燥，得到大分子枸杞多糖；收集透析袋外溶液，浓缩冷冻干燥，得到小分子枸杞多糖；步骤2，大分子枸杞多糖的精制将大分子枸杞多糖配成水溶液，加入无水乙醇，使乙醇的体积分数为30％，沉淀12h，离心收集第一次多糖上清液和第一次多糖沉淀，向第一次多糖沉淀中加蒸馏水复溶，离心，收集的上清液经冷冻干燥，得到初级纯化的第一个枸杞多糖组分；接着向第一次多糖上清液中加入无水乙醇，使乙醇的体积分数为50％，沉淀12h，离心收集第二次多糖上清液和第二次多糖沉淀，向第一次多糖沉淀中加蒸馏水复溶，离心，收集的上清液经冷冻干燥，得到初级纯化的第二个枸杞多糖组分；继续向第二次多糖上清液中加入无水乙醇，使乙醇的体积分数为70％，沉淀12h，离心收集第三次多糖沉淀，向第三次多糖沉淀中加蒸馏水复溶，离心，收集的上清液经冷冻干燥，得到初级纯化的第三个枸杞多糖组分；将初级纯化的第一、二、三个枸杞多糖组分分别经Sephadex G‑100柱层析分离纯化，分别得到第一、二、三个高纯度枸杞多糖。