[发明专利]一种油气微生物勘探方法

摘要

本发明涉及一种油气微生物勘探技术，其包括：(1)设计采样点平面矩阵；(2)采集样品；(3)微生物培养法检测丁烷氧化菌含量；(4)荧光定量PCR检测低级烃氧化菌含量；(5)选择候选勘探区；(6)确定候选井位。

主权项

一种油气微生物勘探方法，其特征在于包括以下步骤：(1)在勘探区内设置采样点平面矩阵，结合勘探区地形和平面矩阵确定采样点的坐标；(2)采集样品，样品的采样量为10‑100g，采样深度为20‑60cm，所采集的样品在0至‑20℃保存和运输；(3)利用选择性培养基通过微生物培养法检测丁烷氧化菌的含量，绘制等值线，确定丁烷氧化菌培养异常区，通过选择培养法检测丁烷氧化菌的含量，先采用以丁烷为唯一碳源的液体培养基进行富集，再以丁醇为唯一碳源的固体平板通过平板稀释法检测样本中丁烷氧化菌的含量，所述选择性培养基中包括K₂HPO₄ 1.75g，KH₂PO₄ 0.96g，NaNO₃ 2.0g，MgCl₂ 0.1g，(NH4)₂SO4 0.1g，微量元素0.2mL，pH为7.2；其中每升微量元素中含有CaCl₂ 5.54g，ZnCl₂ 5.3g，MnCl₂ 5.06g，FeSO₄ 4.99g，(NH₄)₆Mo₇O₂₄ 1.10g，CuSO₄ 1.57g，CoCl₂ 1.61g；(4)对丁烷氧化菌培养异常区的样本进行实时荧光定量PCR检测，所述实时荧光定量PCR针对低级烃氧化菌的特异性保守区或功能区进行检测，采用SYBR Green I荧光染料进行定量，所述低级烃氧化菌包括甲烷氧化菌、乙烷氧化菌和丙烷氧化菌；(5)根据实时荧光定量PCR的结果，选择候选勘探区；(6)在微生物培养结果、荧光定量PCR结果的基础上，结合地表温度、土壤岩性、土壤pH值、土壤盐度、地表植被等因素，确定井位候选点；其中：不使用微生物培养法检测甲烷氧化菌、乙烷氧化菌和丙烷氧化菌的含量，并且不使用实时荧光定量PCR检测丁烷氧化菌的含量。