[发明专利]多聚体蛋白的制备方法有效
| 申请号： | 201710550242.1 | 申请日： | 2012-06-25 |
| 公开（公告）号： | CN107365388B | 公开（公告）日： | 2021-05-14 |
| 发明（设计）人： | 江岛大辅;佐藤春奈;津本浩平;伊达雅代 | 申请（专利权）人： | 味之素株式会社 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C07K1/113;C12P21/02 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 卢曼;鲁炜 |
| 地址： | 日本东京都*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 一种由使具有免疫球蛋白折叠结构的蛋白和能够形成亚单元结构的蛋白融合而得到的单体蛋白组成的多聚体蛋白的制备方法，该制备方法包括下述步骤：步骤(A)，准备在微生物的菌体内呈不溶性颗粒形态的蛋白，该蛋白为上述单体蛋白；步骤(B)，利用含有月桂酰‑L‑Glu的水溶液增溶步骤(A)中准备的单体蛋白；步骤(C)，在含有精氨酸盐酸盐的缓冲液中稀释步骤(B)中得到的溶液，降低月桂酰‑L‑Glu的浓度；以及步骤(D)，利用凝胶过滤层析等将步骤(C)中得到的溶液的溶剂置换成缓冲液。 | ||
| 搜索关键词： | 多聚体 蛋白 制备 方法 | ||
【主权项】：
多聚体蛋白的制备方法，所述多聚体蛋白是由使具有免疫球蛋白折叠结构的蛋白和能够形成亚单元结构的蛋白或其功能性片段融合而得到的单体蛋白组成的，该制备方法包括下述步骤：步骤(A)，准备在微生物的菌体内呈不溶性颗粒形态的蛋白，该蛋白为使具有免疫球蛋白折叠结构的蛋白与能够形成亚单元结构的其他蛋白融合而得到的单体蛋白；步骤(B)，利用含有月桂酰谷氨酸或其盐的水溶液增溶步骤(A)中准备的单体蛋白；步骤(C)，在含有精氨酸或精氨酸衍生物的缓冲液中稀释步骤(B)中得到的溶液，降低月桂酰谷氨酸或其盐的浓度；以及步骤(D)，利用选自下述(d1)～(d4)的方法，将步骤(C)中得到的溶液的溶剂置换成缓冲液，(d1) 选自凝胶过滤层析、离子交换层析、疏水性相互作用层析和它们的组合的柱层析；(d2) 超滤法；(d3) 透析法；以及(d4) (d1)～(d3)中的两种以上的组合。
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