[发明专利]一种牛跟腱Ⅰ型胶原的提取方法

摘要

本发明属于生物医用材料技术领域，具体涉及一种牛跟腱Ⅰ型胶原的提取方法；该方法具体通过以下步骤实现的：将新鲜牛跟腱洗净后，去除脂肪、腱膜及肌肉，切块腱，碳酸氢钠水溶液浸泡、清洗，晾干得纯牛跟；将纯牛跟腱加入到含有三乙醇胺的肉豆蔻酸溶液中浸泡，清洗，晾干；将液氮中加入晾干的牛跟腱，研磨成粉末，得牛跟腱粉末；取牛跟腱粉末，加入醋酸‑醋酸钠缓冲溶液，加入胃蛋白酶，角鲨烯，搅拌均匀后，酶解，然后加入二巯基乙酸乙二醇酯，振荡反应，得酶解液；将酶解液盐析透析后，得牛跟腱Ⅰ型胶原。本发明提供的制备方法简单，对设备要求低；所得产品为高纯度的具有三螺旋结构的Ⅰ型胶原，不会对神经组织产生机械性损伤，生物相容性好。

主权项

一种牛跟腱Ⅰ型胶原的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将新鲜牛跟腱洗净后，去除脂肪、腱膜及肌肉，切块，加入碳酸氢钠水溶液浸泡16h，取出后去离子水清洗，晾干得纯牛跟腱；（2）将纯牛跟腱加入到含有三乙醇胺的肉豆蔻酸溶液中浸泡2‑3h，取出后去离子水清洗，晾干；（3）将液氮中加入上述晾干的牛跟腱，待不沸腾后研磨成粉末，得牛跟腱粉末；（4）取20g牛跟腱粉末，加入1000mL醋酸‑醋酸钠缓冲溶液，加入胃蛋白酶,角鲨烯，搅拌均匀后，在35‑37℃下，搅拌酶解40‑50h，然后加入二疏基乙酸乙二醇酯，在28‑30℃下，振荡反应2‑3h，得酶解液；（5）将酶解液盐析透析后，得牛跟腱Ⅰ型胶原。