[发明专利]一种生产郁金香组培苗的方法

摘要

本发明公开了一种生产郁金香组培苗的方法，涉及植物组培繁育领域，包括以下步骤1)外植体消毒选取健康无病的郁金香花种子作为外植体进行消毒处理；2)煎煮制取郁金香花提取液；3)接种诱导将外植体接种于固体培养基上进行愈伤诱导，促使发芽成苗；4)增值继代培养切取幼苗茎段转入到继代固体培养基中，直至茎段增殖，得丛生芽；5)生根培养待丛生芽的单芽长至一定长度，移植至生根培养基中培养。本发明生产成本低、能获得鳞茎较大、生长迅速、植株健壮的郁金香组培苗，有效地提高组培苗之后的移栽成活率。

主权项

一种生产郁金香组培苗的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)外植体消毒：选取健康无病的郁金香花种子作为外植体，将种子经流水冲洗2‑4min后，在超净工作台上用体积百分数为75％的乙醇溶液表面灭菌1‑3min，无菌水冲洗3次，用质量百分数为0.1‑0.3％的HgCl2溶液灭菌4‑6min，无菌水冲洗4‑6次；(2)郁金香花提取液的制备：取适量新鲜郁金香花瓣加入到开放的提取罐中，加入水加热到煮沸状态煎煮40‑60min，叶片与水的料液体积比为1:2‑4，之后倒出提取液至液体存储罐中；再向提取罐中加入水加热到煮沸状态煎煮1‑2h，且叶片与水的料液体积比为1:3‑5，倒出提取液至所述液体存储罐中，最后浓缩液体存储罐中的提取液至原体积的1/5‑1/3，得郁金香花提取液；(3)接种诱导：将步骤(1)消毒后的外植体接种于固体培养基上进行愈伤诱导，促使发芽成苗，其中固体培养基以1/2MS为基本培养基，并添加30‑50g/L郁金香花提取液，另外再在固体培养基中添加10‑20g/L的NH4HCO3调节PH值至7.0‑7.5；(4)增值继代培养：切取步骤(2)中形成的幼苗茎段2‑4cm，转入到继代固体培养基中，直至茎段增殖，得丛生芽，其中固体培养基以1/2B5为基本培养基，并添加20‑30g/L郁金香花提取液，另外再在固体培养基中添加10‑20g/L的NH4HCO3调节PH值至7.0‑7.5；(5)生根培养：待所述丛生芽的单芽长至3.0‑5.0cm时，将郁金香组培苗移植至生根培养基中，其培养基以1/2MS为基本培养基，并添加30‑40g/L郁金香花提取液，另外再在固体培养基中添加10‑20g/L的NH4HCO3调节PH值至7.0‑7.5。