[发明专利]植物内生细菌多样性16SrDNA扩增子制备方法在审
申请号: | 201710568923.0 | 申请日: | 2017-07-13 |
公开(公告)号: | CN107312847A | 公开(公告)日: | 2017-11-03 |
发明(设计)人: | 樊济才;陈龙;张璐璐;高楠;胡秋萍 | 申请(专利权)人: | 上海美吉生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11;C12N15/10 |
代理公司: | 上海恒锐佳知识产权代理事务所(普通合伙)31286 | 代理人: | 黄海霞 |
地址: | 201321 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供了一套用于高通量测序的引物,所述引物由针对植物内生细菌16S rDNA V5~V7可变区片段的引物对799F/1193R和连接在所述引物对799F/1193R的5'端的Barcode序列组成,其中,所述799F的序列为SEQ ID NO1,所述1193R的序列为SEQ ID NO4,与所述799F的5'端连接的Barcode序列选自SEQ ID NO5‑28中的序列,与所述1193R的5'端连接的Barcode序列选自SEQ ID NO29‑52中的序列。本发明通过两轮的巢式PCR特异地扩增植物内生细菌16S rDNA V5~V7可变区,获得5'端带有Barcode序列的适用于目前二代高通量测序平台的扩增子。采用本发明提供的方法进行植物内生细菌多样性研究,可显著提高植物内生细菌16S rDNA的扩增效率,极大地减少测序数据中宿主数据的占比,降低研究成本。 | ||
搜索关键词: | 植物 细菌 多样性 16 srdna 扩增 制备 方法 | ||
【主权项】:
用于高通量测序的的引物,其特征在于,所述引物由针对植物内生细菌16S rDNA V5~V7可变区片段的引物对799F/1193R和连接在所述引物对799F/1193R的5'端的Barcode序列组成,其中,所述799F的序列为SEQ ID NO:1,所述1193R的序列为SEQ ID NO:4,与所述799F的5'端连接的Barcode序列选自SEQ ID NO:5‑28中的序列,与所述1193R的5'端连接的Barcode序列选自SEQ ID NO:29‑52中的序列。
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