[发明专利]一种重组斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶的制备方法及应用有效
申请号: | 201710575781.0 | 申请日: | 2017-07-14 |
公开(公告)号: | CN107312786B | 公开(公告)日: | 2019-10-29 |
发明(设计)人: | 王文龙;王金玲;冯陈晨;刘春霞;呼和巴特尔 | 申请(专利权)人: | 内蒙古农业大学 |
主分类号: | C12N15/57 | 分类号: | C12N15/57;C12N9/64;C12N15/11;C12N15/10;C12N15/70;G01N33/573 |
代理公司: | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 | 代理人: | 董芙蓉 |
地址: | 010018 内蒙古自治区呼和*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | 本发明公开了一种重组斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶的制备方法及应用,通过斯氏副柔线虫转录组测序,预测出的编码基因与已公布的线虫数据库比对分析,找出斯氏副柔线虫特有基因,用RT‑PCR方法从斯氏副柔线虫中扩增出特有基因Pj_CPR,克隆测序后,构建到原核表达载体pET30a中,转化至E.coli BL21,进行诱导表达,用Western‑bloting法验证重组蛋白rCPR的免疫原性。斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶Pj_CPR基因重组蛋白经纯化后,建立了家畜斯氏副柔线虫iELISA检测方法。 | ||
搜索关键词: | 一种 重组 斯氏副柔 线虫 半胱氨酸 蛋白酶 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶Pj_CPR基因,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;所述斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶Pj_CPR基因的编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示;斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶Pj_CPR基因的特异性PCR引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4所示。
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