[发明专利]中成药咽炎片标准特征图谱的构建方法与应用

摘要

本发明涉及一种中成药咽炎片标准特征图谱的构建方法与应用。取R,S‑告依春、芍药苷、哈巴俄苷对照品，咽炎片样品和按咽炎片处方比例及工艺制备的分别缺少玄参、板蓝根、天冬、麦冬、牡丹皮、制百部、青果、制款冬花、木蝴蝶、地黄、蝉蜕、薄荷油的12种阴性样品，分别制备对照品、供试品和阴性样品溶液，精密吸取上述溶液各1μL注入液相色谱仪中，按设定的色谱条件进行测定得到相应的色谱图，并以中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行计算后即生成咽炎片的标准特征图谱。本发明首次构建的咽炎片的标准特征图谱，其所包含的特征峰全面，定位准确，方法快速，可有效鉴别该中成药的真伪并评价其质量的优劣，有望成为咽炎片中成药质量控制的标准方法。

主权项

1.一种中成药咽炎片标准特征图谱的构建方法，其特征在于包括对照品溶液、供试品溶液和阴性样品溶液的制备，并分别精密吸取对照品溶液，供试品溶液和阴性样品溶液注入液相色谱仪中进行测定以生成咽炎片的标准特征图谱，具体步骤如下：（1）上述对照品溶液的制备：精密称取R,S‑告依春对照品10.35mg、芍药苷对照品12.24mg、哈巴俄苷对照品10.08mg，所述R,S‑告依春对照品含量为100%、所述芍药苷对照品含量为96.4%、所述哈巴俄苷对照品含量为96.0%，分别置于50mL量瓶中，加甲醇定容至50ml，制成对照品浓溶液 ；分别精密量取对照品浓溶液各5mL，置于25mL量瓶中，加甲醇定容至25mL，制成每1mL含R,S‑告依春41.40μg、芍药苷47.20μg、哈巴俄苷 38.71μg的混合溶液作为对照品溶液；（2）上述供试品溶液的制备：咽炎片样品10片，除去包衣，精密称定，研细，精密称定粉末1g，加入20%甲醇20mL，超声处理30分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，制成供试品溶液；（3）上述阴性样品溶液的制备：按《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第二册收载的咽炎片处方比例及工艺制备的且分别缺少玄参、板蓝根、天冬、麦冬、牡丹皮、制百部、青果、制款冬花、木蝴蝶、地黄、蝉蜕、薄荷油的阴性样品，并按供试品溶液的制备方法制备12种阴性样品溶液；之后分别精密吸取上述对照品溶液，供试品溶液和阴性样品溶液各1μL，分别注入液相色谱仪中，按照设定的色谱条件进行测定，检测并记录20分钟的色谱图，并以国家药典委员会的中药色谱指纹图谱相似度评价软件系统进行计算后即生成咽炎片的标准特征图谱，其中的9个共有特征峰的标定是通过对照品溶液，供试品溶液和阴性样品溶液的色谱图中的色谱峰出峰时间和色谱峰是否存在进行比较，即以此可得出供试品溶液图谱中9个共有特征峰的归属，并按照出峰时间选定并命名1～9号特征峰：其中1号峰为未知成分峰，属于地黄；2号峰为未知成分峰，属于百部、天冬、麦冬、青果；3号峰为R,S‑告依春峰，属于板蓝根；4号峰为未知成分峰，属于板蓝根、百部；5号峰为芍药苷峰，属于牡丹皮；6号峰为未知成分峰，属于木蝴蝶、牡丹皮；7号峰为未知成分峰，属于百部、木蝴蝶、玄参；8号峰为未知成分峰，属于百部、款冬花；9号峰为哈巴俄苷峰，属于玄参；上述液相色谱仪的设定条件：色谱柱：Dikma Endevaorsil C18 2.1×100mm，1.8μm；以甲醇为流动相A，以水为流动相B，进行梯度洗脱0～4 min，90%B→ 80%B，4～10 min，80%B→ 40%B，10～14 min，40%B，14～15 min，40%B→ 80%B，15～18 min，80%B→ 90%B，18～20 min，90%B，流速为每分钟0.2ml；检测波长为278nm；柱温为30℃；理论板数按哈巴俄苷峰计算应不低于10000。