[发明专利]一种尿酸的无酶比色检测方法

摘要

本发明属于分析化学技术领域，涉及一种尿酸的无酶比色检测方法。本发明首先制备集成化CoP/NF整体式类过氧化物酶，然后以CoP/NF作为类过氧化物酶，催化TMB和过氧化氢溶液的氧化还原反应，产生显色物质TMBox，因TMBox能被尿酸选择性地还原成无色TMB，原显色反应产生的吸光度随尿酸浓度的增加而降低，通过测定最终所得显色物质的吸光度，得到吸光度随尿酸浓度的增加而减少的曲线，根据此标准曲线来确定待测物的尿酸含量。本发明公开的分析方法既不需要过氧化物酶，也不需要尿酸氧化酶，实现了尿酸的无酶检测，检测成本低廉，操作简单；尿酸的检测范围为1～200μM，检测限低至1μM；对尿酸的响应灵敏，具有良好的特异性，可实现对血清和尿液中尿酸的准确分析。

主权项

1.一种尿酸的无酶比色检测方法，首先绘制紫外吸收光谱标准工作曲线，然后通过工作曲线来确定待测物的尿酸含量，其特征在于，包括如下步骤：/n1）取2.32 mL的醋酸盐缓冲液，依次加入480μL尿酸磷酸缓冲溶液、0.05 mL 8 mM的TMB、0.15 mL 9.8 M的过氧化氢溶液和1片0.5 cm×0.5 cm 的CoP/NF，然后将体系混合均匀；所述尿酸磷酸缓冲溶液的浓度为1μM、2μM、5μM、10μM、20μM、30μM、50μM、75μM、100μM、150μM或200μM，所述CoP/NF指磷化钴CoP纳米片阵列生长在泡沫镍NF表面而形成的整体式类过氧化物酶；/n2）将混合液在30℃水浴中反应4～36 min；/n3）用紫外-可见吸收分光光度计测定混合溶液紫外-可见吸收光谱，记录波长为652nm处的吸光度并绘制尿酸浓度-吸光度标准工作曲线；/n4）将待测尿酸样品重复步骤1）-2），用紫外-可见吸收分光光度计测定吸光度，通过标准工作曲线获得尿酸浓度。/n