[发明专利]一种用于纯化生物抗菌肽的免疫纳米磁性抗体的制备及其应用方法

摘要

本发明公开了一种用于纯化生物抗菌肽的免疫纳米磁性抗体的制备及其应用方法，免疫纳米磁性抗体的制备，包括生物抗菌肽的抗体在醛基，氨基，环氧基，巯基和或酸酐基磁性表面上固定；免疫纳米磁性颗粒的封闭，免疫纳米磁性抗体的应用方法，包括免疫磁性颗粒捕获生物抗菌肽；免疫纳米磁性颗粒上抗菌肽的洗脱。本发明的有益效果是，生物抗菌肽样品纯化分离操作复杂、分离效率低、污染隐患的技术问题，实用性强。

主权项

1.一种用于纯化生物抗菌肽的免疫纳米磁性抗体的制备，其特征在于，包括如下步骤：步骤一、生物抗菌肽的抗体在醛基，氨基，环氧基，巯基和或酸酐基磁性表面上固定，包括如下工艺流程：(1)取纳米磁性颗粒悬液加入到离心管中，轻摇悬浮；(2)置于磁力分离架上，磁性分离，弃上清液；(3)在含有纳米磁珠的离心管内加入共价偶联缓冲液，轻轻悬浮纳米磁珠；(4)将含磁珠的离心管置于磁力分离架上收集纳米磁珠，弃上清液后，磁珠备用；(5)在取适量抗体溶液放入到上述已制备的含纳米磁性颗粒的离心管中，放置于20－40摄氏度中，静置15－30分钟，使磁性颗粒和生物抗菌肽抗体达到共价最大偶联；(6)反应完毕后，磁性分离，弃上清液；(7)加入纳米磁珠清洗缓冲液，轻摇重悬磁粒；(8)在磁粒分离架上分离抗体磁珠，放置于室温中，静置1－5分钟，弃上清液，得到免疫纳米磁性颗粒；步骤二、免疫纳米磁性颗粒的封闭，包括如下工艺流程；(1)在步骤一中得到的免疫纳米磁性颗粒中加入封闭剂溶液，轻微摇动混合，封闭免疫纳米磁性颗粒上的多余结合位点；(2)用纳米磁珠清洗缓冲液对封闭后上的免疫纳米磁性颗粒进行多次清洗；(3)将免疫纳米磁性颗粒悬于纳米抗体磁珠保存缓冲液中，对其进行2－8摄氏度保存。