[发明专利]蔓越桔的化学成分标准指纹图谱及其构建方法与应用

摘要

本发明涉及植物化学成分指纹图谱技术领域，具体涉及蔓越桔的一种化学成分标准指纹图谱及其构建方法、应用。本发明包括如下步骤提取蔓越桔的花青苷溶液；液相色谱仪的流速0.8 mL/min，柱温35°C，进样体积10 μL，200–800 nm范围内全波长扫描吸收光谱，检测波长为525 nm。流动相A相为5%甲酸水；B相为15%甲醇乙腈；线性洗脱；将蔓越桔制成标准样品溶液在上述液相色谱操作条件下注入进行梯度洗脱得到化学成分标准指纹图谱。本发明获得的化学成分标准指纹图谱能够清晰地反应出蔓越桔各个花青苷成分的特征峰出峰位置，是一种快速、高效分析蔓越桔化学成分指纹图谱的新方法，有助于蔓越桔各个品种的辨别。

主权项

一种蔓越桔化学成分标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，步骤如下：1）称50 g±0.5 g蔓越桔果实放入溶剂搅拌机中，加入50 mL提取溶剂，匀化样品直至获得均质匀浆，时间不超过20秒；2）将布氏漏斗连接上真空泵，使匀浆穿过烧结玻璃漏斗，所得滤液即为蔓越桔果实花青苷的抽提液，将抽提液储存在棕色不透光的试剂瓶里，‑20 °C保存；3） 使用高效液相色谱，经过 C18 反相色谱柱分离，使用二极管阵列检测器在525 nm检测；色谱分析条件为：流速0.8 mL·min–1，柱温35°C，进样体积10 μL，200–800 nm范围内全波长扫描吸收光谱，流动相A相为5%甲酸水（v/v）；B相为15%甲醇乙腈（v/v）；4）线性洗脱程序：0 min，5%B；40 min，16%B；45 min，5%B；5）将蔓越桔各个品种的花青苷制成标准样品溶液在上述步骤3）和步骤4）操作条件下注入进行梯度洗脱即得蔓越桔化学成分标准指纹图谱。