[发明专利]基于体外反应体系筛选黄曲霉SUMO化靶蛋白的方法有效
| 申请号： | 201710647254.6 | 申请日： | 2017-08-01 |
| 公开（公告）号： | CN107389945B | 公开（公告）日： | 2019-02-22 |
| 发明（设计）人： | 聂鑫怡;李玲;岳跃威;汪世华 | 申请（专利权）人： | 福建农林大学 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;C40B50/06 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350002 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明涉及基于体外反应体系筛选黄曲霉SUMO化靶蛋白的方法，该体系由SUMO化反应溶液体系组成，其中包含了原核表达的黄曲霉SUMO化酶系中的修饰分子AfSumO，SUMO E1活化酶AfAosA‑AfUbaB，SUMO E2结合酶AfUbcI，SUMO E3连接酶以及待检测的蛋白或药物。利用该体系一方面可以快速鉴定/筛选影响黄曲霉SUMO化修饰过程的药物分子或小分子化合物；同时利用该体系在体外方便快速的检测某种蛋白是否能被黄曲霉的SUMO化体系修饰，进而鉴定/筛选潜在的SUMO化靶标蛋白。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 体外 反应 体系 筛选 黄曲霉 sumo 蛋白 方法 | ||
【主权项】：
1.一种黄曲霉SUMO化酶系的体外反应体系，其特征在于：该体系由SUMO化反应溶液体系组成，其中包含了由修饰分子AfSumO、SUMO E1活化酶AfAosA及AfUbaB、SUMO E2结合酶AfUbcI、SUMO E3连接酶分别经过原核表达后得到的重组蛋白，以及待检测的蛋白或药物；所述的原核表达的黄曲霉SUMO化酶系中的修饰分子AfSumO，其编码序列选自：核苷酸编码序列SEQ ID No. 1，蛋白序列SEQ ID No. 2；所述的SUMO E1活化酶AfAosA及AfUbaB，其编码序列选自：核苷酸序列SEQ ID No. 3和SEQ ID No. 4，分别对应的编码蛋白序列SEQ ID No. 5和SEQ ID No. 6；所述的SUMO E2结合酶AfUbcI，其编码序列选自：核苷酸序列SEQ ID No. 7，其编码的蛋白序列SEQ ID No. 8；体系中的所选取的SUMO化酶系中的SUMO E3连接酶选自AfSizA，其编码序列选自： 核苷酸编码序列SEQ ID No. 9，其编码的蛋白序列SEQ ID No. 10。
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