[发明专利]抑制甲型流感病毒复制的shRNA序列及其应用有效
| 申请号： | 201710651645.5 | 申请日： | 2017-08-02 |
| 公开（公告）号： | CN107586778B | 公开（公告）日： | 2020-09-25 |
| 发明（设计）人： | 马壮;孙文武;史亮;王忠华;曹建平 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军沈阳军区总医院 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/11;C12N15/66;C12N15/85;A61K48/00;A61K31/713;A61P31/16 |
| 代理公司： | 沈阳晨创科技专利代理有限责任公司 21001 | 代理人： | 崔晓蕾 |
| 地址： | 110016 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明提供了一段shRNA序列：GCTGGTCTGACTCACATAATG，将该序列退火后，插入siRNA表达质粒，转化大肠杆菌。经过克隆PCR筛选阳性克隆，保留菌种。扩增基因工程菌，提取纯化质粒。将该质粒转染MDCK细胞。然后以流感病毒感染该细胞，48小时后，收集细胞培养上清，提取总RNA，以RT‑PCT方法检测培养上清中的流感病毒含量。以该质粒与PEI复合物形式给予BALB/C小鼠雾化吸入，连续3天，每天30分钟。然后以流感病毒攻击该小鼠，3天后处死小鼠。取出肺脏制成组织匀浆，从组织匀浆中提取总RNA以RT‑PCT方法检测培养上清中的流感病毒含量。根据不同组流感病毒的含量可以确定该shRNA具有抑制流感病毒复制的作用。 | ||
| 搜索关键词： | 抑制 流感病毒 复制 shrna 序列 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种抑制甲型流感病毒复制的shRNA序列，其特征在于，shRNA序列为：GCTGGTCTGACTCACATAATG。
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