[发明专利]一种双荧光报告重组质粒载体及其构建方法和应用在审

专利信息
申请号: 201710658585.X 申请日: 2017-08-04
公开(公告)号: CN107686846A 公开(公告)日: 2018-02-13
发明(设计)人: 李星;张媛;赵莉;韩娟娟;张菲 申请(专利权)人: 陕西师范大学
主分类号: C12N15/85 分类号: C12N15/85;C12N15/65;C12Q1/68
代理公司: 西安恒泰知识产权代理事务所61216 代理人: 李郑建
地址: 710062 *** 国省代码: 陕西;61
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摘要: 发明公开了一种双荧光报告重组质粒载体,含有编码的绿色荧光蛋白基因序列、红色荧光蛋白基因序列和miRNA特异靶基因的3’非翻译区序列。构建方法为首先用PCR方法扩增绿色荧光蛋白基因和红色荧光蛋白基因;然后将扩增的绿色荧光蛋白基因片段插入到质粒载体pTRE3G‑BI启动子的3’方向上,获得重组质粒载体pTRE3G‑GFP,并进行测序分析,将扩增的红色荧光蛋白基因片段插入到质粒载体pTRE3G‑GFP启动子的5’方向上,获得重组质粒载体pTRE3G‑GFP‑mCherry,并进行测序分析,用PCR方法扩增靶基因的3’非翻译区序列插入到质粒载体pTRE3G‑GFP‑mCherry的mCherry 3’方向上,将验证正确后的重组质粒载体命名为pTRE3G‑GFP‑mCherry‑3UTR。该双荧光报告重组质粒载体可应用于验证miRNA与其靶基因是否在序列上具有相互结合的关系。
搜索关键词: 一种 荧光 报告 重组 质粒 载体 及其 构建 方法 应用
【主权项】:
一种双荧光报告重组质粒载体,其特征在于,含有编码的绿色荧光蛋白基因序列、红色荧光蛋白基因序列和miRNA特异靶基因的3’非翻译区序列。
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