[发明专利]一种具有大斯托克斯位移的近红外发射氧杂蒽荧光染料制备方法

摘要

一种具有大斯托克斯位移的近红外发射氧杂蒽荧光染料制备方法及应用，本发明的优点是：通过直线延长氧杂蒽共轭体系的策略设计合成一类最大吸收波长超过600nm，最大荧光发射波长超过730nm，Stokes位移超过100nm的氧杂蒽荧光染料，是目前已知罗丹明荧光染料中斯托克斯位移最大的荧光染料之一。细胞成像实验中，该染料展示出好的水溶性、生物相容性、小的生物毒性，靶向定位溶酶体。另外，染料结构中含有螺环内酯结构，可作为近红外发射染料荧光报告基团进行多种近红外发射荧光开启型生物荧光探针的设计。总之，本发明提供了一种具有大斯托克斯位移的近红外发射氧杂蒽染料的设计合成方法，并将其用于荧光探针设计开发中。

主权项

1.一种具有大斯托克斯位移的近红外荧光发射的氧杂蒽荧光染料的制备方法，所述荧光染料的发射波长位于近红外区，具有大于100nm的斯托克斯位移；其特征在于所述制备方法的流程如下所示：其步骤如下：1)将2‑(4‑二乙氨基‑2‑羟基苯甲酰基)苯甲酸和N‑乙基‑2‑甲氧基吩噻嗪在冰水浴中逐滴加入甲磺酸搅拌均匀，避光加热，油浴温度70‑80℃，反应12小时冷却至室温，得到反应液；2)将上述反应液冷却后倒入去离子水中搅拌并用饱和碳酸氢钠水溶液调节至中性，采用二氯甲烷萃取三次，有机相用无水硫酸钠干燥后减压蒸馏除去溶剂得到粗产品；粗产品用柱层层析硅胶进行分离、提纯，所用洗脱剂为体积比为100：10‑25的二氯甲烷‑乙酸乙酯混合液，得到目标产物具有大斯托克斯位移的近红外荧光发射的氧杂蒽染料TJ730；3)将上述步骤2)得到的TJ730与含量为98wt％硫酸和无水乙醇按照1：40：200的摩尔比加入到圆底烧瓶中，避光回流加热24‑28小时后冷却至室温，得到反应液；4)将上述步骤3)的反应液倒入去离子水中，加入固体NaCl，然后用饱和NaHCO₃水溶液中和至中性，并用二氯甲烷萃取三次，有机相用无水硫酸钠干燥后，减压蒸馏除去溶剂得到粗产品，通过柱层层析硅胶分离、提纯，所用洗脱剂为体积比为100：10‑25的二氯甲烷‑乙醇混合液，得到目标产物蓝色固体酯化衍生物2。