[发明专利]一种利用细胞传感器评价抗氧化能力的方法

摘要

一种细胞传感器、其制备方法以及利用该细胞传感器评价抗氧化能力的方法。提供了一种细胞传感器、其制备方法以及利用该细胞传感器评价抗氧化能力的方法，该细胞传感器以巨噬细胞作为传感介质，采用电化学阻抗作为指标，突破了常规检测评价的束缚，为评价抗氧化能力提供一条崭新的途径。细胞传感器包括裸金电极以及固定在裸金电极上的巨噬细胞RAW264.7。本发明以建立细胞模型的方式，模拟巨噬细胞RAW264.7氧化应激损伤情况，深入研究评价抗氧化物质对于巨噬细胞抗氧化性能的研究，这对推动抗氧化物质对于细胞抗氧化性能的研究具有重要意义，尤其适用于研究抗氧化物质对人体的抗氧化作用。

主权项

1.一种利用细胞传感器评价抗氧化能力的方法，所述细胞传感器包括裸金电极以及固定在裸金电极上的巨噬细胞RAW264.7，其特征在于，所述方法包括如下步骤：1)、空白：将细胞传感器一在37℃下置于Tyrode缓冲液中，然后添加PMA丙二醇甲醚醋酸酯，使PMA浓度为100ng/mL，静置10分钟，用PBS缓冲液洗涤2‑4次，然后将细胞传感器一连接到电化学工作站；2)、预处理：将待测物与细胞传感器二在37℃下置于Tyrode缓冲液中，然后加入PMA，使PMA浓度为100ng/mL，静置10min，然后用PBS缓冲液洗涤2‑4次后，将细胞传感器二连接到电化学工作站；3)、电化学检测：在含有1.0mM Fe(CN)₆^3‑或1.0mM Fe(CN)₆^4‑或0.1M PBS的溶液中分别对细胞传感器一和细胞传感器二进行电化学方法检测，记录电流信号并分别读取峰值电流记为I₀和I_S；4)、判断待测物是否具有抗氧化能力：4.1)当I₀＞I_S时，说明该待测物具有抗氧化性，进而进入步骤5)评价其抗氧化能力；4.2)当I₀≤I_S时，说明该待测物没有抗氧化性；5)评价待测物的抗氧化能力：通过计算相对抗氧化能力值(RAC)来评价待测物的抗氧化能力，相对抗氧化能力值通过以下公式计算：其中RAC指的是相对抗氧化能力值，I₀是用100ng/mL PMA刺激时的峰值电流，I_S是在待测物保护作用下的峰值电流，I是没有PMA刺激的峰值电流。