[发明专利]LIPUS对三维支架材料上MC3T3‑E1细胞内RNA表达影响的研究方法在审

专利信息
申请号: 201710690605.1 申请日: 2017-08-14
公开(公告)号: CN107345255A 公开(公告)日: 2017-11-14
发明(设计)人: 吴琳;刘洁;冯丽芳;曹洪娟;刘笑涵 申请(专利权)人: 中国医科大学附属口腔医院
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 沈阳东大知识产权代理有限公司21109 代理人: 赵嬛嬛
地址: 110002 辽宁*** 国省代码: 辽宁;21
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摘要: 发明提供一种LIPUS对三维支架材料上MC3T3‑E1细胞内RNA表达影响的研究方法,包括将MC3T3‑E1细胞接种到三维支架材料上;将接种完毕的三维支架材料和超声探头浸入水中,保持超声探头和材料的距离为5cm,从材料底部加载LIPUS,加载过程中每2~3天更换一次MC3T3‑E1细胞的培养基;停止加载LIPUS后,收集材料上的MC3T3‑E1细胞,进行全转录组和miRNA的高通量测序,筛选差异表达的mRNA、lncRNA、miRNA,并结合GO和KEGG进行整合分析。本发明为后续研究LIPUS促进三维材料内成骨分化的分子生物学机制提供可靠数据和新的研究思路。
搜索关键词: lipus 三维 支架 材料 mc3t3 e1 细胞内 rna 表达 影响 研究 方法
【主权项】:
LIPUS对三维支架材料上MC3T3‑E1细胞内RNA表达影响的研究方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将MC3T3‑E1细胞接种到三维支架材料上;(2)将接种完毕的三维支架材料和超声探头浸入水中,保持超声探头和材料的距离为5cm,从材料底部加载LIPUS,加载参数为:超声频率1~3.3MHz,强度10~100mW/cm2,10~30min/次,1次/d,加载周期为1~21d,加载过程中每2~3天更换一次MC3T3‑F1细胞的培养基;(3)停止加载LIPUS后,收集材料上的MC3T3‑E1细胞,进行全转录组和miRNA的高通量测序,筛选差异表达的mRNA、lncRNA、miRNA,并结合GO和KEGG进行整合分析。
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