[发明专利]一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法

摘要

本发明涉及一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法。步骤如下：第一步，MePEG‑Peptide‑Tri‑CL的制备；第二步，纳米粒的制备：以姜黄素为模型药物，将MePEG‑Peptide‑Tri‑CL和姜黄素溶于丙酮为脂相溶液，将表面活性剂溶于水中为水相，按不同的脂相/水相比将脂相慢慢滴入水相，持续搅拌，形成载姜黄素‑星状纳米粒原液。将制得的纳米粒溶液真空抽滤1h除去有机溶剂，6000r/min离心20min后，获得溶液纳米粒溶液。发明实现了姜黄素水中溶解度的提高，同时在抗肿瘤治疗过程中具有缓控释和靶向特性，适用于静注及口服等多种给药方式。

主权项

一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法，其特征在于，所述制备方法步骤如下：第一步，MePEG‑Peptide‑Tri‑CL的制备(1)Tri‑CL的合成将1，2，3‑丙烷三甲酸和ε‑己内酯按比例加入到25mL三口烧瓶中，120℃‑140℃下溶解后，在氮气保护下，加入一定量的辛酸亚锡，密封，120℃‑140℃反应9.5‑48h，产物趁热溶于适量二氯甲烷中，滴加至冰乙醚中，过滤得到的沉淀，25℃下干燥24h；(2)Tri‑CL‑NHBoc的合成取Tri‑CL溶于适量甲苯中，加入N‑(叔丁氧羰基)乙醇胺，氮气保护下，加入一定量的三乙胺，密闭，30～60℃下反应12～60h，得到Tri‑CL‑NHBoc，将反应混合物逐滴滴加到冰甲醇中，6000r/min离心30min，除去上清液，所得沉淀于25℃下真空干燥24h；(3)Tri‑CL‑NH2的合成取Tri‑CL‑NHBoc溶于适量二氯甲烷中，加入三氟乙酸，氮气保护，在室温下搅拌反应4～10h，将反应液用质量分数5％KHCO3水溶液萃取三次，合并下层有机相，蒸馏水洗涤三次，合并有机相加入一定量无水MgSO4干燥，搅拌过夜，次日过滤除去MgSO4固体，滤液滴加到冰甲醇中，6000r/min离心30min，除去上清液，所得沉淀于25℃真空干燥；(4)MePEG‑COOH的合成MePEG和丁二酸酐按比例投入50mL三口烧瓶中，加入适量吡啶搅拌直到全部溶解，在氮气保护下，快速加入一定比例的4‑二甲氨基吡啶、三乙胺，密封后室温反应12～48h，反应液逐滴滴加到适量冰乙醚中，过滤，得到的沉淀为MePEG‑COOH，沉淀于25℃真空干燥24h；(5)MePEG‑NHS的合成MePEG‑COOH和N‑羟基琥珀酰亚胺按比例加入50ml三口烧瓶中，加入适量的乙腈溶解，再加入一定量N，N‑二环己基碳二亚胺(DCC)，室温反应12～48h，将反应液滴加到适量冰乙醚中，过滤得到的滤饼即为产物，产物于25℃真空干燥24h；(6)MePEG‑Peptide的合成将适量DMAP和1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)加入25mL三口烧瓶中，用少量乙腈：水混合溶液溶解，将50mg peptide溶于少量乙腈：水混合溶液，加入反应瓶中，氮气保护下在冰浴下搅拌，活化2小时，2小时后，移去冰浴，MePEG‑NHS溶于适量乙腈中，投入反应瓶中，氮气保护，室温下反应48～96h，反应液冷冻干燥，所得固体为产物；(7)MePEG‑Peptide‑Tri‑CL的合成称取MePEG‑Peptide加入到25mL三口烧瓶中，加入适量二氯甲烷溶解，适量DCC和DMAP溶于适量二氯甲烷后加入到反应瓶中，氮气保护，冰浴下活化2小时，2小时后，将适量Tri‑CL‑NH2溶于适量二氯甲烷中，投入到反应瓶，氮气保护，室温下反应48～96h，反应液装入截留分子量14000的透析袋中，前5小时，每一小时换一次纯化水，之后，每隔2小时换一次纯化水。透析结束后，冷冻干燥得到产物；第二步，纳米粒的制备以姜黄素为模型药物，将MePEG‑Peptide‑Tri‑CL和姜黄素溶于丙酮为脂相溶液，将表面活性剂溶于水中为水相，按不同的脂相/水相比将脂相慢慢滴入水相，持续搅拌，形成载姜黄素‑星状纳米粒原液，将制得的纳米粒溶液真空抽滤1h除去有机溶剂，6000r/min离心20min后，获得溶液纳米粒溶液。