[发明专利]一种产生三基因片段DNA融合方法及应用有效
申请号: | 201710695660.X | 申请日: | 2017-08-14 |
公开(公告)号: | CN107384950B | 公开(公告)日: | 2020-03-20 |
发明(设计)人: | 罗鹏;赵喜珍;何香燕;卢泽禹 | 申请(专利权)人: | 广州诺晶生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N15/10 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 宋静娜;郝传鑫 |
地址: | 510000 广东省广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种产生三片段DNA融合方法,其包括以下步骤:(1)获得包含A基因片段和C基因片段的质粒;(2)以步骤(1)中的质粒为模板,反向PCR扩增获得A基因片段和C基因片段分别位于产物两端的基因片段;(3)以含D基因片段的基因为模板,PCR扩增获得A’DC’基因片段;(4)将步骤(2)中得到的基因片段与步骤(3)中A’DC’基因片段进行体外同源重组;(5)将步骤(4)中的重组产物转化宿主细胞,获得含ADC基因片段的质粒;(6)以步骤(5)中的质粒为模板,PCR扩增获得ADC基因片段。本发明方法简单快速,非特异性扩增基因片段少,成本低,可广泛用于不同基因片段的融合、启动子和融合基因构建、带长同源臂的靶基因构建等。 | ||
搜索关键词: | 一种 产生 基因 片段 dna 融合 方法 应用 | ||
【主权项】:
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