[发明专利]一种含重组耐高温葡萄糖异构酶细胞的固定化方法有效
| 申请号： | 201710714933.0 | 申请日： | 2017-08-19 |
| 公开（公告）号： | CN107400667B | 公开（公告）日： | 2021-06-08 |
| 发明（设计）人： | 郑裕国;贾东旭;王腾;金利群 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | C12N11/14 | 分类号： | C12N11/14;C12N11/089;C12P19/24;C12P19/02 |
| 代理公司： | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人： | 黄美娟;李世玉 |
| 地址： | 310014 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种含重组耐高温葡萄糖异构酶细胞的固定化方法：将含耐高温葡萄糖异构酶基因的重组基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体用pH值6.5‑7.5的缓冲液制成菌悬液；向菌悬液中添加硅藻土，搅拌混匀，再加入聚乙烯亚胺室温搅拌絮凝1～2h，然后加入三羟甲基磷，在0～30℃、100r/min搅拌交联1～2h后，抽滤，滤饼粉碎，得到所述含耐高温葡萄糖异构酶固定化细胞颗粒；本发明固定化细胞具有优良热稳定性和重复使用率，于90℃保温72h保持70.1％以上，在85℃条件下连续催化D‑葡萄糖生成D‑果糖的15个批次中，转化率均大于50％，并且催化剂仍保留85.8％以上初始酶活。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 耐高温 葡萄糖 异构酶 细胞 固定 方法 | ||
【主权项】：
一种含重组耐高温葡萄糖异构酶细胞的固定化方法，其特征在于所述方法为：将含耐高温葡萄糖异构酶基因的重组基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体用pH值6.5‑7.5的缓冲液制成菌悬液；向菌悬液中添加硅藻土，搅拌混匀，再加入聚乙烯亚胺室温搅拌絮凝1～2h，然后加入三羟甲基磷，在0～30℃、100r/min搅拌交联1～2h后，抽滤，滤饼室温风干后粉碎成粒，得到所述含耐高温葡萄糖异构酶固定化细胞颗粒；所述硅藻土与菌悬液中湿菌体重量比为0.01～0.1：1。
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