[发明专利]一种基于智能型纳米发光微粒标记放大的化学发光免疫分析法及其应用有效
| 申请号： | 201710717695.9 | 申请日： | 2017-08-21 |
| 公开（公告）号： | CN107561268B | 公开（公告）日： | 2019-11-08 |
| 发明（设计）人： | 苏恩本;赵欢;林琦峰;陈赢;胡昕 | 申请（专利权）人： | 基蛋生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/543 | 分类号： | G01N33/543;G01N33/577;G01N33/532;G01N21/76 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人： | 傅婷婷;徐冬涛 |
| 地址： | 210048 江苏省南*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于智能型纳米发光微粒标记放大的化学发光免疫分析法及其应用。包括将一株待测抗原的抗体共价偶联到智能型纳米发光微粒表面的羧基上，形成具有放大标记效果的智能型纳米发光微粒；将待测抗原的另一株抗体直接或者间接包被在固相载体上，加入智能型纳米发光微粒以及含待测抗原的样本，通过抗体‑抗原‑抗体的相互作用，形成固相载体‑抗体‑待测抗原‑抗体‑智能型纳米发光微粒免疫复合物；分离出免疫复合物后，加入激发物，用化学发光检测仪检测发光强度从而计算得到待测抗原的浓度。本发明能够提高发光分子和抗体标记效率，增强发光强度。使得本发明具有灵敏度高，检测范围更宽等优势。 | ||
| 搜索关键词： | 发光微粒 抗原 抗体 化学发光免疫分析法 免疫复合物 固相载体 放大 化学发光检测仪 标记效果 发光分子 共价偶联 抗体标记 灵敏度 激发物 检测 包被 羧基 样本 应用 | ||
【主权项】：
1.一种基于温度敏感型纳米发光微粒标记放大的化学发光免疫分析法，其特征在于包括将一株待测抗原的抗体共价偶联到温度敏感型纳米发光微粒表面的羧基上，形成具有放大标记效果的温度敏感型纳米发光微粒；将待测抗原的另一株抗体直接或者间接包被在固相载体上，加入温度敏感型纳米发光微粒以及含待测抗原的样本，通过抗体‑抗原‑抗体的相互作用，形成固相载体‑抗体‑待测抗原‑抗体‑温度敏感型纳米发光微粒免疫复合物；经清洗分离出免疫复合物后，加入已预热到最低临界溶解温度的激发物，检测前加热免疫复合物温度至最低临界溶解温度，温度敏感型纳米发光微粒中的氢键减弱，凝胶崩溃，发光物暴露，产生强烈的发光强度，用化学发光检测仪检测发光强度从而计算得到待测抗原的浓度；其中，所述的温度敏感型纳米发光微粒为表面同时带有羧基和两亲性的异丙基酰胺基，且粒径为50‑200纳米的内部包裹发光物质的由异丙基丙烯酰胺以及甲基丙烯酸或丙烯酸经共价交联聚合后形成的水凝胶微粒。
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