[发明专利]一种针对胰腺癌的Car‑T细胞制备方法

摘要

本发明公开了一种针对胰腺癌的Car‑T细胞制备方法，该方法包括如下步骤采集患者外周血，提取外周血单个核细胞；将核细胞用PBS洗涤，弃去上清液，取细胞沉淀中加入GT551重悬；将核细胞以1x106个/孔接种于24孔板中，于每孔中加入培养液和60IU/mL IL‑2，培养24‑36h，之后每孔板中加入20‑40μL PersonGenTM生物膜；每隔16‑18h将培养的细胞分孔一次，每孔补充培养液1‑2mL，每隔36‑48h补充PersonGenTM生物膜10‑15μL，持续培养16‑18d。本发明公开了一种针对胰腺癌的Car‑T细胞的制备方法，得到的Car‑T细胞可以通过细胞制剂注射进入胰腺癌患者体内，该方法提供了一种行之有效的胰腺癌治疗方法，并且有效降低患病复发几率。

主权项

一种针对胰腺癌的Car‑T细胞制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：S1、采集患者外周血，提取外周血单个核细胞；S2、将S1中得到的外周血单个核细胞用PBS洗涤，弃去上清液，取细胞沉淀中加入GT551重悬；S3、将S2中得到的外周血单个核细胞以1x106个/孔接种于24孔板中，于每孔中加入培养液和60IU/mL IL‑2，培养24‑36h，之后每孔板中加入20‑40μL PersonGenTM生物膜；S4、每隔16‑18h将S3中培养的细胞分孔一次，每孔补充培养液1‑2mL，每隔36‑48h补充PersonGenTM生物膜10‑15μL，持续培养16‑18d；S5、将慢病毒对S4中的T细胞进行转染并扩增培养，获得CAR‑T细胞。