[发明专利]一种猪血的酶解方法有效
| 申请号： | 201710733969.3 | 申请日： | 2017-08-24 |
| 公开（公告）号： | CN107488694B | 公开（公告）日： | 2018-10-19 |
| 发明（设计）人： | 章斌;侯小桢;王忠合;陈晓芸 | 申请（专利权）人： | 韩山师范学院 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06 |
| 代理公司： | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人： | 刘晔 |
| 地址： | 521041*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种猪血的酶解方法，该方法在猪血红细胞破碎处理方式的基础上，用酶法制备猪血红蛋白酶解产物，该方法简单、易操作，制得的酶解产物抗氧化活性好。所述的酶解方法为：(1)猪血红细胞的制备：取新鲜猪血并加入抗凝血剂，于4℃保存；然后冷冻离心，得血红球和血浆；去血浆收集血红球并加入抗凝血剂搅拌混匀，再冷冻离心，去上清液取沉淀，即得猪血红细胞，于‑18℃冷冻保存备用；(2)猪血红蛋白酶解物的制备：取猪血红细胞，按10％的细胞浓度加入碱性蛋白酶的磷酸缓冲液，冰浴中超声破碎处理，后水浴加热，然后加蛋白酶水解，灭酶，后将水解物于4000r/min冷冻离心10min，上清液即为猪血红蛋白酶解产物。 | ||
| 搜索关键词： | 血红细胞 冷冻离心 酶解 蛋白酶解产物 抗凝血剂 上清液 制备 种猪 蛋白酶解物 蛋白酶水解 碱性蛋白酶 抗氧化活性 磷酸缓冲液 超声破碎 搅拌混匀 冷冻保存 酶法制备 酶解产物 破碎处理 水浴加热 新鲜猪血 血浆收集 水解物 冰浴 灭酶 血浆 备用 沉淀 细胞 保存 | ||
【主权项】：
1.如权利要求1所述的猪血的酶解方法，其特征在于，所述的酶解方法为：（1）猪血红细胞的制备：取新鲜猪血并按19：1的重量比例迅速加入5g/L浓度的抗凝血剂即重量比为1： 7．5： 5的柠檬酸、柠檬酸钠和磷酸二氢钠，于4℃保存；然后在4℃、4000r/min条件下高速冷冻离心20min，得血红球和血浆；去血浆收集血红球并加入一倍体积的抗凝血剂，搅拌混匀，再于4℃、4000r/min条件下离心20min，去上清液取沉淀，即得血红细胞，于‑18℃冷冻保存备用;（2）猪血红蛋白酶解物的制备：称取一定量的血红蛋白，按10％的细胞浓度加入6％碱性蛋白酶的磷酸缓冲液，磷酸缓冲液的pH为8．0，冰浴中超声破碎5min，超声功率为300W，工作5s、间隔5s，后水浴加热至55℃，然后加碱性蛋白酶，使碱性蛋白酶的浓度达到6%，水解1h，灭酶，后将水解物于4000r／min冷冻离心10min，上清液即为猪血红蛋白酶解产物。
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