[发明专利]一种基于细菌增长对细菌快速镜检的方法

摘要

本发明设计并建立了一种基于细菌增长的用于镜检检测大肠杆菌与鼠伤寒沙门氏菌的新方法。通过向待测样品溶液中添加β‑内酰胺类抗生素使得细菌菌体增长，并联合膜过滤与磁分离实现对大肠杆菌与鼠伤寒沙门氏菌的特异性与高灵敏度检测，使得细菌数目在光学显微镜下即可得到判断，该方法可以应用到水样中，整个检测过程可在2小时内完成。经试验验证，本发明方法对大肠杆菌与鼠伤寒沙门氏菌两种细菌的检测限均可低至5个细胞，可以满足快速检测方法的要求。该方法操作简单，成本低，可广泛应用于实际样品中对革兰氏阴性菌的镜检检测中。

主权项

1.一种基于细菌增长对细菌快速镜检的方法，其特征在于，包括步骤如下：S1.向待测样品中添加β‑内酰胺类抗生素和抗体修饰磁球进行孵育处理，在37℃孵育1.5h；其中，β‑内酰胺类抗生素促使待测细菌菌体伸长，便于后续在显微镜下镜检观察；抗体修饰磁球与伸长后的细菌偶联；所述β‑内酰胺类抗生素为氨曲南，所述氨曲南添加浓度为1倍最小抑菌浓度；S2.将步骤S1.处理后的待测样品进行膜过滤，被捕获的细菌可以通过膜过滤操作被截留到滤膜上，然后将滤膜进行磁分离处理进一步去除杂质；S3.将步骤S2.处理后的滤膜置于显微镜下观察并计数；所述细菌为大肠杆菌或鼠伤寒沙门氏菌；所述抗体为抗大肠杆菌抗体或抗鼠伤寒沙门氏菌抗体，所述抗体添加浓度为0.1～5μg/mL。