[发明专利]一种金钱松试管苗培育方法

摘要

本发明提供一种金钱松试管苗培育方法，属于珍稀祼子植物组织培养育苗技术领域。金钱松试管苗培育方法包括以下步骤1)取材；2)纸桥液体培养；3)中间繁殖体增殖；4)生根培养；5)炼苗移栽。上述金钱松试管苗培育方法使金钱松种子的萌发率、成苗率及成活率高，可以大规模的生产金钱松。

主权项

1.一种金钱松试管苗培育方法，其特征在于：包括以下步骤：1)取材：取一年生金钱松实生苗2.0‑3.0㎝带顶芽的嫩枝，剪去叶片后洗净并消毒得培养基苗；2)纸桥液体培养：把圆形滤纸折成酒杯状塞进试管中，使滤纸开口的一端朝向试管的底部，倒入液体培养基达到试管内滤纸的二分之一，使滤纸封闭的一端露出所述液体培养基，将所述培养基苗在超净工作台上剥取长2mm、带1‑2根腋芽的茎尖放置于试管内滤纸封闭的一端上，在试管口上塞上棉塞进行光照培养，当丛生芽分化形成后进行中间繁殖体增殖；所述液体培养基由基本培养基+玉米素0.5‑1㎎/L+胺鲜酯0.1‑0.5㎎/L+硫脲5‑10㎎/L+谷氨酸50㎎/L+水解酪蛋白质50‑100㎎/L+葡萄糖2‑5㎎/L组成；所述基本培养基由硝酸钾2600㎎/L+硫酸胺150㎎/L+二氯化钙250㎎/L+七水硫酸镁400㎎/L+磷酸氢二钾300㎎/L+硫酸亚铁15㎎/L+乙二胺四乙酸钠25㎎/L+硫酸锌10㎎/L+二氧化钛1.0㎎/L+碘化钾5.0㎎/L+烟酸5.0㎎/L+抗坏血酸0.5㎎/L+盐酸硫胺素1.0㎎/L+肌醇150㎎/L组成；3)中间繁殖体增殖：当丛生芽分化形成后，将丛生芽切割成单株，在液体分化培养基上进行光照增殖培养，并生长成试管苗，所述液体分化培养基与所述液体培养基的组成相同；4)生根培养：当试管苗生长到2‑3㎝时，将其转入生根培养基中，在温度为23‑25℃的条件下，进行生根培养；所述生根培养基由1/2基本培养基+2号ABT生根粉30‑50㎎/L+谷氨酸50‑100mg/L组成；所述1/2基本培养基由硝酸钾1300㎎/L+硫酸胺85㎎/L+二氯化钙125㎎/L+七水硫酸镁200㎎/L+磷酸氢二钾150㎎/L+硫酸亚铁7.5㎎/L+乙二胺四乙酸钠17.5㎎/L+硫酸锌5㎎/L+二氧化钛0.5㎎/L+碘化钾2.5㎎/L+烟酸2.5㎎/L+抗坏血酸0.25㎎/L+盐酸硫胺素0.5㎎/L+肌醇75㎎/L组成；5)炼苗移栽：当试管苗形成2‑3㎝长的根时，转移到常温下炼苗3‑5天，洗净根部培养基，然后在20㎎/L的农用链霉素溶液中浸泡1‑2min，移栽至消毒后的基质中，将练苗区与其他区域隔离，温度控制在23‑25℃，湿度控制在80％‑90％。