[发明专利]一种木藤蓼降尿酸降血糖作用的研究方法

摘要

本发明公开了一种木藤蓼降尿酸降血糖作用的研究方法，该方法包括以下步骤：步骤1、关于降尿酸的供试品的制备；步骤2、关于降尿酸的造模剂的配制；步骤3、关于降尿酸的阳性药的配制；步骤4、关于降尿酸的造模与给药；步骤5、关于降尿酸的取材与检测；步骤6、关于降尿酸的统计学处理；步骤7、关于降血糖的供试品的制备；步骤8、关于降血糖的造模剂的配制；步骤9、关于降血糖的阳性药的配制；步骤10、糖尿病模型的建立；步骤11、关于降血糖的动物分组及给药；给药前后体重变化；步骤12、给药前后体重变化；步骤13、脏器系数的变化；步骤14、关于降血糖的统计学处理。本发明为木藤蓼降尿酸降血糖作用的研究奠定了基础。

主权项

一种木藤蓼降尿酸降血糖作用的研究方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、关于降尿酸的供试品的制备依据药材常用量2～6g，本试验以口服生药量6g作为成人60kg最大日用量，按照实验动物与人用药量的换算公式计算，得到小白鼠的用药量1.2g/Kg；设此为中剂量组，在此数据上加减分设高剂量和低剂量；即高剂量组2.4g/Kg、中剂量组1.2g/Kg、低剂量组0.6g/Kg；取木藤蓼冻干粉，均用0.5％CMC‑Na溶液准确配置供试溶；步骤2、关于降尿酸的造模剂的配制精密称取氧嗪酸钾5g，研磨后加入0.5％CMC‑Na溶液至0.4L，超声分散，配置成12.5mg/ml的氧嗪酸钾混悬液，临用前摇匀，使其均匀分散；步骤3、关于降尿酸的阳性药的配制取别嘌醇100mg1片，研磨后加入0.5％CMC‑Na溶液至0.4L，超声分散，配置成0.25mg/ml的混悬液，临用前摇匀，使其均匀分散；步骤4、关于降尿酸的造模与给药小鼠每组10只，随机分为12组，依次为空白对照组、模型对照组、别嘌醇组，木藤蓼高、中、低剂量组；分组后开始给药造高尿酸模型，除正常对照组给予等容积的溶媒，其余每组小鼠均给氧嗪酸钾250mg/kg制备高尿酸模型，造模1h后除正常对照组和模型对照组给与等溶剂的溶媒外，其余各组分别给于相应地治疗药物，以上给药方式均为灌胃给药，给药容积为0.2ml/10g，每日造模和给药各一次，持续给药7天；步骤5、关于降尿酸的取材与检测末次给药1h后眼眶取血，室温下自然凝血1h，3000rpm离心5min，分离得到血清；按尿酸测试剂盒说明书采用磷钨酸还原法测量血清尿酸Serum Rric Acid,SUA；计算公式：其中标准品浓度50mg/L解剖取适量小鼠肝组织称重，加入9倍量的生理盐水，制备10％肝匀浆液，3 000rpm离心10min，取上清液，按照黄嘌呤氧化酶检测试剂盒方法测定黄嘌呤氧化酶活性Xanthine Oxidase，XOD；计算公式：其中黄嘌呤摩尔消光系数为12.6×10‑3，光径为1cm，匀浆蛋白含量为227g/L，反应时间为20min，于530nm处测吸光度值；步骤6、关于降尿酸的统计学处理所得数据用SPSS 16.0软件分析，用表示；采用单因素方差分析进行组间显著性检验；步骤7、关于降血糖的供试品的制备依据药材常用量2～6g，本试验以口服生药量6g作为成人60kg最大日用量，按照实验动物与人用药量的换算公式计算，得到小白鼠的用药量1.2g/Kg；取木藤蓼冻干粉，均用蒸馏水溶解准确配置供试溶液；步骤8、关于降血糖的造模剂的配制四氧嘧啶很容易氧化，必须在临用前配制；将四氧嘧啶用生理盐水溶解，配成2％的溶液；步骤9、关于降血糖的阳性药的配制取盐酸二甲双胍1片500mg，加入生理盐水至0.4L，配置成浓度为12.5mg/ml；步骤10、糖尿病模型的建立步骤11、关于降血糖的动物分组及给药选取造模成功的小鼠50只，按照血糖值均衡原则分为5个组，分别为模型组、阳性对照组盐酸苯乙双胍组木藤蓼提取物组；分组次日开始每天灌胃均按0.2ml/10g给相应的药物，空白对照组和模型对照组予以等体积蒸馏水，连续给药7天；末次给药后禁食不禁水12h，尾静脉取血测空腹血糖值；步骤12、给药前后体重变化记录造模后给药前的体重与给药后的体重变化；步骤13、脏器系数的变化给药后，处死小鼠，解剖，取其肝脏、肾脏、脾脏、胰腺，称重，并计算脏器系数；步骤14、关于降血糖的统计学处理采用计算机的统计软件spss16.0对实验数据进行分析，计量资料数据以表示。