[发明专利]提高梅花成熟胚子叶不定芽诱导率的胚处理方法及专用培养基

摘要

本发明属于植物组织培养领域，涉及提高梅花成熟胚子叶不定芽诱导率的胚处理方法及专用培养基。步骤包括：a)将消毒后梅花成熟胚切去远胚轴端子叶，保留近胚轴端子叶；b)用解剖刀剥去种皮，刀尖沿两片子叶间的缝隙插入，将两片子叶分开；c)用解剖刀刀尖将子叶内侧顶端的胚根、胚轴和胚芽轻轻挑除，确保全部挑除干净，尽量保留近胚轴端的子叶；d)将挑除胚根、胚轴、胚芽后成熟胚的每片子叶沿中线一分为二切开，得到四个近胚轴端成熟胚子叶外植体；e)将近胚轴端成熟胚子叶接种到再生培养基中，诱导不定芽，使不定芽伸长、生根培养得到再生植株。本发明还公开了专用培养基。本发明成熟胚子叶不定芽诱导率达42.64％～50％。

主权项

1.一种提高梅花成熟胚子叶不定芽诱导率的胚处理方法，其特征包括下列步骤：/na)将消毒后的梅花成熟胚在超净工作台上切去远胚轴端子叶，保留近胚轴端子叶；/nb)用解剖刀剥去种皮，将刀尖沿两片子叶间的缝隙插入，扭动解剖刀将两片子叶分开；/nc)用解剖刀刀尖将子叶内侧顶端的胚根、胚轴和胚芽轻轻挑除，并确保全部挑除干净，保留近胚轴端的子叶；/nd)将步骤c)挑除胚根、胚轴、胚芽后成熟胚的每片子叶沿中线一分为二切开，得到四个近胚轴端成熟胚子叶外植体；/ne)将四个近胚轴端成熟胚子叶外植体接种到再生培养基中，诱导不定芽，对再生的不定芽进行伸长与生根培养后，得到再生植株；/n其中：/n再生培养基的成分及配比如下:/nQL基本培养基：NH₄NO₃ 400mg/L；KNO₃ 928mg/L；MgSO₄·7H₂O 739.4mg/L；Ca(NO₃)₂·4H₂O 1364mg/L；KH₂PO₄ 107.4mg/L；Mg(NO₃)₂·6H₂O 87.4mg/L；H₃BO₄ 6.2mg/L；MnSO₄·2H₂O0.76mg/L；NaMoO₄·2H₂O 0.25mg/L；CuSO₄·5H₂O 0.025mg/L；ZnSO₄·7H₂O 8.6mg/L；KI0.08mg/L；FeSO₄·7H₂O 27.9mg/L mg；Na₂·EDTA·7H₂O 37.3mg/L；烟酸1mg/L；甘氨酸2mg/L；盐酸硫胺素2mg/L；/n附加0.5mg/L6-苄氨基嘌呤；1.0mg/L噻苯隆；0.8mg/L吲哚丁酸；30.0g/L蔗糖；8.5g/L琼脂；培养基的pH为5.8～6.0。/n