[发明专利]竹叶椒药材中生物碱类成分的测定方法

摘要

本发明公开了一种竹叶椒药材中生物碱类成分的测定方法，该方法包括步骤(1)对照品溶液制备；步骤(2)供试品溶液制备和步骤(3)UFLC‑MS/MS检测。本发明根据竹叶椒中活性成分和杂质成分的结构性质特点，通过大量实验筛选出最佳的流动相组成，洗脱程序、流速，柱温和色谱柱等分析条件，经多次实验验证表明。本发明以盐酸小檗碱为内标化合物，可同时测定6种生物碱的含量。该方法检测灵敏度高，稳定性好，可以客观、全面、准确的评价竹叶椒药材的质量，对控制药材的质量和保证临床疗效具有重要意义。

主权项

一种竹叶椒药材中生物碱类成分的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)对照品溶液的制备：分别精密称取Isodecaline、6–acetonyldihydrochelerythrine、N‑Methylanhydrotetrahydroberberrubine A、escholidine perchlorate、别隐品碱，白鲜碱对照品和盐酸小檗碱为内标化合物，精确吸取乙醇或甲醇，超声溶解，摇匀，制得对照品溶液；(2)供试品溶液的制备：竹叶椒药材供试品溶液的制备：精密称取一定质量竹叶椒药材，置于锥形瓶中，加入提取溶剂，超声提取，放冷，称重，加入相同提取溶剂补重，摇匀，离心，取上清液，即得竹叶椒药材供试品溶液；(3)UFLC‑MS/MS检测：吸取步骤(1)对照品溶液，依次稀释成6个不同浓度的对照品溶液，分别注入UFLC‑MS/MS系统进行分析制定标准曲线；然后取步骤(2)供试品溶液注入UFLC‑MS/MS系统，根据标准曲线计算供试品溶液中生物碱含量；其中，UFLC条件为：采用C18反向色谱柱，流动相A为0‑0.1‰甲酸水溶液，B为含0‑0.1‰甲酸的乙腈溶液，梯度洗脱，流速0.35‑0.45mL·min－1，柱温35‑45℃；质谱仪采用电喷雾离子源，扫描方式为多反应监测，对化合物Isodecaline、6–acetonyldihydrochelerythrine、N‑Methylanhydrotetrahydroberberrubine A、escholidine perchlorate、别隐品碱、白鲜碱及内标物盐酸小檗碱在正、负离子模式下进行检测。