[发明专利]一种评价烟草主流烟气诱发炎症反应用动物体外气管模型建立方法、评价方法有效
| 申请号： | 201710796458.6 | 申请日： | 2017-09-06 |
| 公开（公告）号： | CN107607699B | 公开（公告）日： | 2019-12-27 |
| 发明（设计）人： | 陈雪梅;李翔;谢复炜;刘惠民;薛博涵;李玉萍;周淑娅;石小雨;华辰凤;乔梁峻;康彧 | 申请（专利权）人： | 中国烟草总公司郑州烟草研究院;郑州大学 |
| 主分类号： | G01N33/50 | 分类号： | G01N33/50;G01N33/68;G01N33/533;G01N33/535;G01N33/543;C12Q1/6883 |
| 代理公司： | 41119 郑州睿信知识产权代理有限公司 | 代理人： | 牛爱周 |
| 地址： | 450001 *** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种评价烟草主流烟气诱发炎症反应用动物体外气管模型建立方法、评价方法，属于卷烟危害评价技术领域。本发明的建立方法，包括如下步骤：1)分离气管环；2)体外培养步骤1)得到的气管环；3)将步骤2)培养后的气管环在烟气冷凝物下暴露1‑24h。评价烟草主流烟气诱发炎症反应的方法还包括：选择评价指标，划分评价标准；评价炎症反应的程度。本发明的方法具有以下优点：1)烟气暴露后气管炎症检测方法的效率高；2)烟气暴露后气管炎症检测方法的具有良好的可重复性，体系稳定准确性高；3)使用范围广：该方法可以适用于卷烟主流烟气、侧流烟气、环境烟气等烟气气溶胶的体外暴露模型。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 评价 烟草 主流 烟气 诱发 炎症 应用 动物 体外 气管 模型 建立 方法 | ||
【主权项】：
1.一种评价烟草主流烟气诱发炎症反应的评价方法，其特征在于：包括以下步骤：/nA. 建立动物体外气管模型：/n1）将冲洗好的成年雄性大鼠气管切成2-6段，每段4-12个软骨环；/n2）使用BGEM培养基采用三维立体培养方式培养步骤1）得到切好的气管环1.5-2.5h；/n3）将步骤2）培养后的气管环在含烟气冷凝物的培养基中暴露培养2-10h；/n所述含烟气冷凝物的培养基由包括如下步骤的方法制得：采用吸烟机提取待测烟的烟气冷凝物，溶于DMSO溶液后，得烟气冷凝物溶液，然后加入组织培养基中，即可；所述含烟气冷凝物的培养基中烟气冷凝物的浓度为50-200μg/mL；/nB. 选择检测炎症细胞浸润生长情况、IL6基因表达量、ICAM-1基因表达量、炎症因子蛋白含量及细胞增殖活性作为评价指标，划分评价标准；/nC. 评价烟草主流烟气诱发炎症反应的程度。/n
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